江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2015年
1期
100-105
,共6页
于建宁%杨燕燕%于峰祥%时小艳%徐小波%王公金
于建寧%楊燕燕%于峰祥%時小豔%徐小波%王公金
우건저%양연연%우봉상%시소염%서소파%왕공금
硫化物醌氧化还原酶%定向表达载体%肠脂肪酸结合蛋白质%肠上皮细胞
硫化物醌氧化還原酶%定嚮錶達載體%腸脂肪痠結閤蛋白質%腸上皮細胞
류화물곤양화환원매%정향표체재체%장지방산결합단백질%장상피세포
sulfide-quinone reductase (SQR)%directed expression vector%intestinal fatty acid-binding protein(IFABP)%intestinal epithelial cell
为建立硫化物醌氧化还原酶(SQR)的肠道定向表达载体,同时通过转染小鼠肠道上皮细胞确定载体的有效性,本试验采用重叠PCR、中间载体法、酶切连接法获得重组载体,通过脂质体转染法将重组载体转入小鼠肠道上皮细胞,并鉴定重组载体的特异性表达.结果显示,成功构建了以肠脂肪酸结合蛋白质(IFABP)为启动子的SQR肠道定向表达载体pcDNA3.1 (-)-IFABP-SQR-GFP,并在小鼠肠道上皮细胞中检测到表达的融合绿色荧光蛋白质(GFP).表明IFABP启动子能够在肠道细胞中定向启动SQR的表达.
為建立硫化物醌氧化還原酶(SQR)的腸道定嚮錶達載體,同時通過轉染小鼠腸道上皮細胞確定載體的有效性,本試驗採用重疊PCR、中間載體法、酶切連接法穫得重組載體,通過脂質體轉染法將重組載體轉入小鼠腸道上皮細胞,併鑒定重組載體的特異性錶達.結果顯示,成功構建瞭以腸脂肪痠結閤蛋白質(IFABP)為啟動子的SQR腸道定嚮錶達載體pcDNA3.1 (-)-IFABP-SQR-GFP,併在小鼠腸道上皮細胞中檢測到錶達的融閤綠色熒光蛋白質(GFP).錶明IFABP啟動子能夠在腸道細胞中定嚮啟動SQR的錶達.
위건립류화물곤양화환원매(SQR)적장도정향표체재체,동시통과전염소서장도상피세포학정재체적유효성,본시험채용중첩PCR、중간재체법、매절련접법획득중조재체,통과지질체전염법장중조재체전입소서장도상피세포,병감정중조재체적특이성표체.결과현시,성공구건료이장지방산결합단백질(IFABP)위계동자적SQR장도정향표체재체pcDNA3.1 (-)-IFABP-SQR-GFP,병재소서장도상피세포중검측도표체적융합록색형광단백질(GFP).표명IFABP계동자능구재장도세포중정향계동SQR적표체.
