江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2015年
1期
87-92
,共6页
张咪%高璐%印伯星%苏万业%杨振泉%顾瑞霞
張咪%高璐%印伯星%囌萬業%楊振泉%顧瑞霞
장미%고로%인백성%소만업%양진천%고서하
牛乳%αs-酪蛋白%ELISA%总蛋白
牛乳%αs-酪蛋白%ELISA%總蛋白
우유%αs-락단백%ELISA%총단백
milk%αs-casein%ELISA%total protein
本研究旨在建立牛乳中总蛋白质的ELISA定量检测方法,并评价该方法在牛乳掺假辨识中的应用效果.首先用αs-酪蛋白标准品免疫新西兰白兔,制备αs-酪蛋白特异性抗血清,并建立αs-酪蛋白的间接ELISA检测方法,结果显示血清效价为1∶640,αs-酪蛋白检测的线性范围是25 ~ 600 ng/ml,R2=0.999 5,回收率是96.6%~105.2%.再应用乳成分分析仪,凯氏定氮法和所建立的ELISA法测定8份来源不同的原料乳中总蛋白和αs-酪蛋白含量,结果显示不同牛乳中总蛋白质含量在0.029 2~0.029 8 g/ml,αs-酪蛋白含量在0.008 4~0.009 2g/ml,占牛乳总蛋白质的比例恒定,平均为0.3,并用该系数建立牛乳中总蛋白质的定量方法.最后对5份人为兑水稀释、添加尿素、BSA和三聚氰胺的模拟掺杂牛乳样品进行检测,测定结果表明基于αs-酪蛋白的ELISA方法比乳成分分析仪法和凯氏定氮法具有更高的灵敏性和特异性,含氮添加物对测定结果无显著影响(P>0.05),更适合于作为原料乳及含乳产品中牛乳蛋白质的定量分析.
本研究旨在建立牛乳中總蛋白質的ELISA定量檢測方法,併評價該方法在牛乳摻假辨識中的應用效果.首先用αs-酪蛋白標準品免疫新西蘭白兔,製備αs-酪蛋白特異性抗血清,併建立αs-酪蛋白的間接ELISA檢測方法,結果顯示血清效價為1∶640,αs-酪蛋白檢測的線性範圍是25 ~ 600 ng/ml,R2=0.999 5,迴收率是96.6%~105.2%.再應用乳成分分析儀,凱氏定氮法和所建立的ELISA法測定8份來源不同的原料乳中總蛋白和αs-酪蛋白含量,結果顯示不同牛乳中總蛋白質含量在0.029 2~0.029 8 g/ml,αs-酪蛋白含量在0.008 4~0.009 2g/ml,佔牛乳總蛋白質的比例恆定,平均為0.3,併用該繫數建立牛乳中總蛋白質的定量方法.最後對5份人為兌水稀釋、添加尿素、BSA和三聚氰胺的模擬摻雜牛乳樣品進行檢測,測定結果錶明基于αs-酪蛋白的ELISA方法比乳成分分析儀法和凱氏定氮法具有更高的靈敏性和特異性,含氮添加物對測定結果無顯著影響(P>0.05),更適閤于作為原料乳及含乳產品中牛乳蛋白質的定量分析.
본연구지재건립우유중총단백질적ELISA정량검측방법,병평개해방법재우유참가변식중적응용효과.수선용αs-락단백표준품면역신서란백토,제비αs-락단백특이성항혈청,병건립αs-락단백적간접ELISA검측방법,결과현시혈청효개위1∶640,αs-락단백검측적선성범위시25 ~ 600 ng/ml,R2=0.999 5,회수솔시96.6%~105.2%.재응용유성분분석의,개씨정담법화소건립적ELISA법측정8빈래원불동적원료유중총단백화αs-락단백함량,결과현시불동우유중총단백질함량재0.029 2~0.029 8 g/ml,αs-락단백함량재0.008 4~0.009 2g/ml,점우유총단백질적비례항정,평균위0.3,병용해계수건립우유중총단백질적정량방법.최후대5빈인위태수희석、첨가뇨소、BSA화삼취청알적모의참잡우유양품진행검측,측정결과표명기우αs-락단백적ELISA방법비유성분분석의법화개씨정담법구유경고적령민성화특이성,함담첨가물대측정결과무현저영향(P>0.05),경괄합우작위원료유급함유산품중우유단백질적정량분석.