西南农业学报
西南農業學報
서남농업학보
SOUTHWEST CHINA JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2015年
1期
168-171
,共4页
郑宽瑜%董家红%尹跃艳%方琦%苏晓霞%张仲凯
鄭寬瑜%董傢紅%尹躍豔%方琦%囌曉霞%張仲凱
정관유%동가홍%윤약염%방기%소효하%장중개
番茄环纹斑点病毒%非结构蛋白%原核表达%抗血清%检测
番茄環紋斑點病毒%非結構蛋白%原覈錶達%抗血清%檢測
번가배문반점병독%비결구단백%원핵표체%항혈청%검측
TZSV%Non-structural protein%Prokaryotic expression%Antiserum%Detection
用RT-PCR从感染番茄环纹斑点病毒(Tomato zorate spot virus,TZSV)的番茄中扩增出编码病毒非结构蛋白NSs基因,将NSs基因构建到原核表达载体pET-30 a中,获得原核表达载体pET-30a-NSs,转化大肠杆菌BL21 (DE3),用IPTG诱导表达.SDS-PAGE电泳分析显示,高效诱导表达了57kDa融合蛋白.用回收纯化的融合蛋白免疫家兔,获得多抗血清.间接ELISA测定多抗血清的效价为1/8192.用制备好的抗血清对TZSV感病病样进行Western blotting检测,能检测到特异性条带.结果表明该抗血清可用于TZSV的检测,并为进一步研究NSs功能奠定了基础.
用RT-PCR從感染番茄環紋斑點病毒(Tomato zorate spot virus,TZSV)的番茄中擴增齣編碼病毒非結構蛋白NSs基因,將NSs基因構建到原覈錶達載體pET-30 a中,穫得原覈錶達載體pET-30a-NSs,轉化大腸桿菌BL21 (DE3),用IPTG誘導錶達.SDS-PAGE電泳分析顯示,高效誘導錶達瞭57kDa融閤蛋白.用迴收純化的融閤蛋白免疫傢兔,穫得多抗血清.間接ELISA測定多抗血清的效價為1/8192.用製備好的抗血清對TZSV感病病樣進行Western blotting檢測,能檢測到特異性條帶.結果錶明該抗血清可用于TZSV的檢測,併為進一步研究NSs功能奠定瞭基礎.
용RT-PCR종감염번가배문반점병독(Tomato zorate spot virus,TZSV)적번가중확증출편마병독비결구단백NSs기인,장NSs기인구건도원핵표체재체pET-30 a중,획득원핵표체재체pET-30a-NSs,전화대장간균BL21 (DE3),용IPTG유도표체.SDS-PAGE전영분석현시,고효유도표체료57kDa융합단백.용회수순화적융합단백면역가토,획득다항혈청.간접ELISA측정다항혈청적효개위1/8192.용제비호적항혈청대TZSV감병병양진행Western blotting검측,능검측도특이성조대.결과표명해항혈청가용우TZSV적검측,병위진일보연구NSs공능전정료기출.
