中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2015年
4期
345-350
,共6页
闫宁宁%李俊%陈小娟%陈永恒%陈林%陈主初
閆寧寧%李俊%陳小娟%陳永恆%陳林%陳主初
염저저%리준%진소연%진영항%진림%진주초
NR4A1%层析%阳离子交换%表达%纯化
NR4A1%層析%暘離子交換%錶達%純化
NR4A1%층석%양리자교환%표체%순화
NR4A1%chromatography%cation-exchange%expression%purification
目的:寻求一种核受体家族蛋白NR4A1 DNA结合域(NR4A1 DNA binding domain,NR4A1-DBD)表达纯化的方法.方法:构建融合蛋白PET28a-NR4A1-DBD表达载体,分别通过镍亲和层析、阳离子交换层析及凝胶过滤的方法对目的蛋白进行纯化.结果:PET28a-NR4A1-DBD蛋白在低温诱导(24℃)时多以可溶性形式存在,通过此纯化,可达到每升培养基产生2～3 mg蛋白,纯度高达95％以上.结论:镍亲和层析是一种可靠、实用的蛋白表达纯化方法,后续使用阳离子交换层析及凝胶过滤可以进一步提高蛋白纯度.
目的:尋求一種覈受體傢族蛋白NR4A1 DNA結閤域(NR4A1 DNA binding domain,NR4A1-DBD)錶達純化的方法.方法:構建融閤蛋白PET28a-NR4A1-DBD錶達載體,分彆通過鎳親和層析、暘離子交換層析及凝膠過濾的方法對目的蛋白進行純化.結果:PET28a-NR4A1-DBD蛋白在低溫誘導(24℃)時多以可溶性形式存在,通過此純化,可達到每升培養基產生2～3 mg蛋白,純度高達95％以上.結論:鎳親和層析是一種可靠、實用的蛋白錶達純化方法,後續使用暘離子交換層析及凝膠過濾可以進一步提高蛋白純度.
목적:심구일충핵수체가족단백NR4A1 DNA결합역(NR4A1 DNA binding domain,NR4A1-DBD)표체순화적방법.방법:구건융합단백PET28a-NR4A1-DBD표체재체,분별통과얼친화층석、양리자교환층석급응효과려적방법대목적단백진행순화.결과:PET28a-NR4A1-DBD단백재저온유도(24℃)시다이가용성형식존재,통과차순화,가체도매승배양기산생2～3 mg단백,순도고체95％이상.결론:얼친화층석시일충가고、실용적단백표체순화방법,후속사용양리자교환층석급응효과려가이진일보제고단백순도.
