泌尿外科杂志(电子版)
泌尿外科雜誌(電子版)
비뇨외과잡지(전자판)
JOURNAL OF UROLOGY FOR CLINICIAN(ELECTRONIC VERSION)
2015年
1期
18-22
,共5页
刘鹏飞%刘晓光%赵扬%徐晓东%牛海涛
劉鵬飛%劉曉光%趙颺%徐曉東%牛海濤
류붕비%류효광%조양%서효동%우해도
膀胱癌%联合培养%微环境%微流控芯片
膀胱癌%聯閤培養%微環境%微流控芯片
방광암%연합배양%미배경%미류공심편
目的 构建一个可供多细胞联合培养的生物平台,初步实现细胞体外培养状态下的膀胱癌微环境模拟.方法 运用微流控技术进行芯片加工.通过在硅片上进行光刻胶旋涂、曝光、烘焙、去胶等步骤制作含有芯片微结构的光刻阳膜.用聚二甲基硅氧烷(PDMS)软印光刻阳膜,通过除气泡、烘焙等步骤制作含有芯片结构的PDMS基片.PDMS基片经过修剪、打孔后与洁净玻璃载体放入等离子清洗机处理,之后封接成密闭通道.将膀胱肿瘤T24细胞、人包皮成纤维细胞、人脐静脉内皮细胞及巨噬细胞包埋在稀释的基质胶中形成细胞悬液,在冰面上进行基质胶灌注及细胞接种.培养一段时间后进行细胞形态学观察.结果 该平台由营养液灌流通道、细胞培养室及基质胶灌注单元构成.营养液灌流通道位于芯片结构的外围,由营养液入口、缓冲流道、营养液流道和营养液出口组成;基质胶灌注单元由4个U型基质胶灌注单元和4个直线形基质胶灌注单元组成,每个基质胶灌注单元由基质胶入口、基质胶流道、微桥和基质胶出口组成;细胞培养结构单元由细胞培养室、细胞接种入口、细胞接种出口和细胞流道构成.各细胞培养室通过微桥相互连通.经显微镜观察,4种细胞在该平台生长状态良好.结论 本研究实现了4种细胞在三维状态下的联合培养,为进一步研究膀胱癌肿瘤微环境提供了良好生物平台.
目的 構建一箇可供多細胞聯閤培養的生物平檯,初步實現細胞體外培養狀態下的膀胱癌微環境模擬.方法 運用微流控技術進行芯片加工.通過在硅片上進行光刻膠鏇塗、曝光、烘焙、去膠等步驟製作含有芯片微結構的光刻暘膜.用聚二甲基硅氧烷(PDMS)軟印光刻暘膜,通過除氣泡、烘焙等步驟製作含有芯片結構的PDMS基片.PDMS基片經過脩剪、打孔後與潔淨玻璃載體放入等離子清洗機處理,之後封接成密閉通道.將膀胱腫瘤T24細胞、人包皮成纖維細胞、人臍靜脈內皮細胞及巨噬細胞包埋在稀釋的基質膠中形成細胞懸液,在冰麵上進行基質膠灌註及細胞接種.培養一段時間後進行細胞形態學觀察.結果 該平檯由營養液灌流通道、細胞培養室及基質膠灌註單元構成.營養液灌流通道位于芯片結構的外圍,由營養液入口、緩遲流道、營養液流道和營養液齣口組成;基質膠灌註單元由4箇U型基質膠灌註單元和4箇直線形基質膠灌註單元組成,每箇基質膠灌註單元由基質膠入口、基質膠流道、微橋和基質膠齣口組成;細胞培養結構單元由細胞培養室、細胞接種入口、細胞接種齣口和細胞流道構成.各細胞培養室通過微橋相互連通.經顯微鏡觀察,4種細胞在該平檯生長狀態良好.結論 本研究實現瞭4種細胞在三維狀態下的聯閤培養,為進一步研究膀胱癌腫瘤微環境提供瞭良好生物平檯.
목적 구건일개가공다세포연합배양적생물평태,초보실현세포체외배양상태하적방광암미배경모의.방법 운용미류공기술진행심편가공.통과재규편상진행광각효선도、폭광、홍배、거효등보취제작함유심편미결구적광각양막.용취이갑기규양완(PDMS)연인광각양막,통과제기포、홍배등보취제작함유심편결구적PDMS기편.PDMS기편경과수전、타공후여길정파리재체방입등리자청세궤처리,지후봉접성밀폐통도.장방광종류T24세포、인포피성섬유세포、인제정맥내피세포급거서세포포매재희석적기질효중형성세포현액,재빙면상진행기질효관주급세포접충.배양일단시간후진행세포형태학관찰.결과 해평태유영양액관류통도、세포배양실급기질효관주단원구성.영양액관류통도위우심편결구적외위,유영양액입구、완충류도、영양액류도화영양액출구조성;기질효관주단원유4개U형기질효관주단원화4개직선형기질효관주단원조성,매개기질효관주단원유기질효입구、기질효류도、미교화기질효출구조성;세포배양결구단원유세포배양실、세포접충입구、세포접충출구화세포류도구성.각세포배양실통과미교상호련통.경현미경관찰,4충세포재해평태생장상태량호.결론 본연구실현료4충세포재삼유상태하적연합배양,위진일보연구방광암종류미배경제공료량호생물평태.