临床肾脏病杂志
臨床腎髒病雜誌
림상신장병잡지
JOURNAL OF CLINICAL NEPHROLOGY
2015年
1期
42-46
,共5页
刘增波%梅长林%胡惠民%王雪琦%付莉莉
劉增波%梅長林%鬍惠民%王雪琦%付莉莉
류증파%매장림%호혜민%왕설기%부리리
肾脏%糖萼%硝酸镧%电镜
腎髒%糖萼%硝痠鑭%電鏡
신장%당악%초산란%전경
Kidney%Glycocalyx%Lanthanum Nitrate%Electron microscope
目的 不同方案灌注小鼠后电镜观察肾脏各种细胞糖萼的显示情况,探讨镧示踪法显示肾脏细胞糖萼的最佳方法.方法 根据灌注方案的不同,将C57/BL6小鼠分为3组:①生理盐水组:小鼠放血后,用生理盐水5 ml自主动脉灌注,取肾脏后用2％硝酸镧一戊二醛固定液固定;②硝酸镧固定液组:用2％硝酸镧一戊二醛固定液5 ml相同方法灌注,取肾脏后固定方法同前;③硝酸镧溶液组:用2％硝酸镧溶液和2％硝酸镧一戊二醛固定液5 ml先后进行灌注,取肾脏后固定方法同前.各组均应用透射电镜观察肾脏的肾间质血管内皮细胞、肾小球内皮细胞、足细胞和肾间质细胞连接的糖萼的显示情况,计算各组不同肾脏细胞糖萼的显示率,并进行比较.结果 镧示踪法透射电镜显示的小鼠肾脏细胞的正常糖萼表现为附着于细胞表面的一层电子致密物层.生理盐水组的肾间质血管内皮细胞、肾小球内皮细胞糖萼层的显示率均为0％;足细胞糖萼的显示率为20％;肾间质细胞连接的糖萼显示率(92％)较高.硝酸镧固定液组的肾间质血管内皮细胞和肾小球内皮细胞显示率较低(分别为16％和12％);足细胞糖萼和细胞连接的糖萼层显示率相对较高(分别为84％和96％).硝酸镧溶液组的肾脏各种细胞糖萼均能清晰显示,肾间质血管内皮细胞、肾小球内皮细胞、足细胞和细胞连接糖萼的显示率分别为100％、96％、92％和100％.与生理盐水组和硝酸镧固定液组比较,硝酸镧溶液组的肾间质血管内皮细胞、肾小球内皮细胞糖萼的显示率均显著增高(P＜0.01).硝酸镧固定液组和硝酸镧溶液组的足细胞糖萼的显示率均较生理盐水组显著增高(P＜0.01).各组的肾间质细胞连接糖萼的显示率无统计学差异(P＞0.05).结论 2％硝酸镧溶液和2％硝酸镧一戊二醛固定液先后灌注小鼠,取肾脏用相同固定液固定后行透射电镜检查,能清晰显示肾脏各种细胞糖萼层,尤其是肾脏血管内皮细胞糖萼层,这为肾脏糖萼的相关研究提供一种可靠的实验方法.
目的 不同方案灌註小鼠後電鏡觀察腎髒各種細胞糖萼的顯示情況,探討鑭示蹤法顯示腎髒細胞糖萼的最佳方法.方法 根據灌註方案的不同,將C57/BL6小鼠分為3組:①生理鹽水組:小鼠放血後,用生理鹽水5 ml自主動脈灌註,取腎髒後用2％硝痠鑭一戊二醛固定液固定;②硝痠鑭固定液組:用2％硝痠鑭一戊二醛固定液5 ml相同方法灌註,取腎髒後固定方法同前;③硝痠鑭溶液組:用2％硝痠鑭溶液和2％硝痠鑭一戊二醛固定液5 ml先後進行灌註,取腎髒後固定方法同前.各組均應用透射電鏡觀察腎髒的腎間質血管內皮細胞、腎小毬內皮細胞、足細胞和腎間質細胞連接的糖萼的顯示情況,計算各組不同腎髒細胞糖萼的顯示率,併進行比較.結果 鑭示蹤法透射電鏡顯示的小鼠腎髒細胞的正常糖萼錶現為附著于細胞錶麵的一層電子緻密物層.生理鹽水組的腎間質血管內皮細胞、腎小毬內皮細胞糖萼層的顯示率均為0％;足細胞糖萼的顯示率為20％;腎間質細胞連接的糖萼顯示率(92％)較高.硝痠鑭固定液組的腎間質血管內皮細胞和腎小毬內皮細胞顯示率較低(分彆為16％和12％);足細胞糖萼和細胞連接的糖萼層顯示率相對較高(分彆為84％和96％).硝痠鑭溶液組的腎髒各種細胞糖萼均能清晰顯示,腎間質血管內皮細胞、腎小毬內皮細胞、足細胞和細胞連接糖萼的顯示率分彆為100％、96％、92％和100％.與生理鹽水組和硝痠鑭固定液組比較,硝痠鑭溶液組的腎間質血管內皮細胞、腎小毬內皮細胞糖萼的顯示率均顯著增高(P＜0.01).硝痠鑭固定液組和硝痠鑭溶液組的足細胞糖萼的顯示率均較生理鹽水組顯著增高(P＜0.01).各組的腎間質細胞連接糖萼的顯示率無統計學差異(P＞0.05).結論 2％硝痠鑭溶液和2％硝痠鑭一戊二醛固定液先後灌註小鼠,取腎髒用相同固定液固定後行透射電鏡檢查,能清晰顯示腎髒各種細胞糖萼層,尤其是腎髒血管內皮細胞糖萼層,這為腎髒糖萼的相關研究提供一種可靠的實驗方法.
목적 불동방안관주소서후전경관찰신장각충세포당악적현시정황,탐토란시종법현시신장세포당악적최가방법.방법 근거관주방안적불동,장C57/BL6소서분위3조:①생리염수조:소서방혈후,용생리염수5 ml자주동맥관주,취신장후용2％초산란일무이철고정액고정;②초산란고정액조:용2％초산란일무이철고정액5 ml상동방법관주,취신장후고정방법동전;③초산란용액조:용2％초산란용액화2％초산란일무이철고정액5 ml선후진행관주,취신장후고정방법동전.각조균응용투사전경관찰신장적신간질혈관내피세포、신소구내피세포、족세포화신간질세포련접적당악적현시정황,계산각조불동신장세포당악적현시솔,병진행비교.결과 란시종법투사전경현시적소서신장세포적정상당악표현위부착우세포표면적일층전자치밀물층.생리염수조적신간질혈관내피세포、신소구내피세포당악층적현시솔균위0％;족세포당악적현시솔위20％;신간질세포련접적당악현시솔(92％)교고.초산란고정액조적신간질혈관내피세포화신소구내피세포현시솔교저(분별위16％화12％);족세포당악화세포련접적당악층현시솔상대교고(분별위84％화96％).초산란용액조적신장각충세포당악균능청석현시,신간질혈관내피세포、신소구내피세포、족세포화세포련접당악적현시솔분별위100％、96％、92％화100％.여생리염수조화초산란고정액조비교,초산란용액조적신간질혈관내피세포、신소구내피세포당악적현시솔균현저증고(P＜0.01).초산란고정액조화초산란용액조적족세포당악적현시솔균교생리염수조현저증고(P＜0.01).각조적신간질세포련접당악적현시솔무통계학차이(P＞0.05).결론 2％초산란용액화2％초산란일무이철고정액선후관주소서,취신장용상동고정액고정후행투사전경검사,능청석현시신장각충세포당악층,우기시신장혈관내피세포당악층,저위신장당악적상관연구제공일충가고적실험방법.
