石河子大学学报（自然科学版）
石河子大學學報（自然科學版）
석하자대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHIHEZI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2015年
1期
84-91
,共8页
王爽%付强%史慧君%于潞%李志强%杜新辉%曹旭东
王爽%付彊%史慧君%于潞%李誌彊%杜新輝%曹旭東
왕상%부강%사혜군%우로%리지강%두신휘%조욱동
结核杆菌%真核细胞%CFP-10%ESAT-6
結覈桿菌%真覈細胞%CFP-10%ESAT-6
결핵간균%진핵세포%CFP-10%ESAT-6
Mycobacterium tuberculosis%eukaryon cell%CFP-10%ESAT-6
为了构建结核分枝杆菌两个毒力因子CFP-10基因和ESAT-6基因共同表达的真核细胞模型,本实验采用脂质体转染方法,将重组表达载体CFP-10-PDsRed 1-N1和ESAT-6-PEGFP-N1同时转染真核细胞293FT,通过倒置荧光显微镜和激光共聚焦观察,并经western blot检测分析.结果显示,经双转染的293FT细胞能够分别发出红色和绿色荧光,既能表达CFP-10,又能表达ESAT-6,且表达的蛋白分布于细胞质中,表明模型构建成功.由此可知,构建的这个细胞模型为进一步研究这两种毒力因子在宿主细胞中的作用机制奠定了基础.
為瞭構建結覈分枝桿菌兩箇毒力因子CFP-10基因和ESAT-6基因共同錶達的真覈細胞模型,本實驗採用脂質體轉染方法,將重組錶達載體CFP-10-PDsRed 1-N1和ESAT-6-PEGFP-N1同時轉染真覈細胞293FT,通過倒置熒光顯微鏡和激光共聚焦觀察,併經western blot檢測分析.結果顯示,經雙轉染的293FT細胞能夠分彆髮齣紅色和綠色熒光,既能錶達CFP-10,又能錶達ESAT-6,且錶達的蛋白分佈于細胞質中,錶明模型構建成功.由此可知,構建的這箇細胞模型為進一步研究這兩種毒力因子在宿主細胞中的作用機製奠定瞭基礎.
위료구건결핵분지간균량개독력인자CFP-10기인화ESAT-6기인공동표체적진핵세포모형,본실험채용지질체전염방법,장중조표체재체CFP-10-PDsRed 1-N1화ESAT-6-PEGFP-N1동시전염진핵세포293FT,통과도치형광현미경화격광공취초관찰,병경western blot검측분석.결과현시,경쌍전염적293FT세포능구분별발출홍색화록색형광,기능표체CFP-10,우능표체ESAT-6,차표체적단백분포우세포질중,표명모형구건성공.유차가지,구건적저개세포모형위진일보연구저량충독력인자재숙주세포중적작용궤제전정료기출.
