西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2015年
3期
459-464
,共6页
方正武%李来运%李晓方%刘志雄
方正武%李來運%李曉方%劉誌雄
방정무%리래운%리효방%류지웅
非生物胁迫%甜荞%木瓜类半胱氨酸蛋白酶%FeRD21
非生物脅迫%甜蕎%木瓜類半胱氨痠蛋白酶%FeRD21
비생물협박%첨교%목과류반광안산단백매%FeRD21
abiotic stresses%buckwheat%papain-like cys protease%FeRD21
该研究以旱区小杂粮作物甜荞(Fagopyrum esculentum)为材料,采用同源克隆、RACE技术和实时荧光定量RT-PCR方法,对其半胱氨酸蛋白酶基因(FeRD21)进行了分离和表达分析.结果表明:(1)FeRD21基因cDNA全长1 750 bp,包含1个1 407 bp的完整开放阅读框,编码468个氨基酸.(2)蛋白序列比对发现,甜荞FeRD21全酶包括信号肽、N末端自主抑制前体区域、蛋白酶、脯氨酸富含结构域和C末端颗粒体蛋白结构域,同时,其蛋白酶结构域包含1个木瓜类蛋白酶家族保守的催化三连体活性位点:Cys168-His304-Asn324.(3)分子系统发生分析证实,其与拟南芥的RD21一致性最高,属类RD21半胱氨酸蛋白酶类.(4)基因表达分析表明,FeRD21能被干旱、高盐、ABA和衰老胁迫诱导.
該研究以旱區小雜糧作物甜蕎(Fagopyrum esculentum)為材料,採用同源剋隆、RACE技術和實時熒光定量RT-PCR方法,對其半胱氨痠蛋白酶基因(FeRD21)進行瞭分離和錶達分析.結果錶明:(1)FeRD21基因cDNA全長1 750 bp,包含1箇1 407 bp的完整開放閱讀框,編碼468箇氨基痠.(2)蛋白序列比對髮現,甜蕎FeRD21全酶包括信號肽、N末耑自主抑製前體區域、蛋白酶、脯氨痠富含結構域和C末耑顆粒體蛋白結構域,同時,其蛋白酶結構域包含1箇木瓜類蛋白酶傢族保守的催化三連體活性位點:Cys168-His304-Asn324.(3)分子繫統髮生分析證實,其與擬南芥的RD21一緻性最高,屬類RD21半胱氨痠蛋白酶類.(4)基因錶達分析錶明,FeRD21能被榦旱、高鹽、ABA和衰老脅迫誘導.
해연구이한구소잡량작물첨교(Fagopyrum esculentum)위재료,채용동원극륭、RACE기술화실시형광정량RT-PCR방법,대기반광안산단백매기인(FeRD21)진행료분리화표체분석.결과표명:(1)FeRD21기인cDNA전장1 750 bp,포함1개1 407 bp적완정개방열독광,편마468개안기산.(2)단백서렬비대발현,첨교FeRD21전매포괄신호태、N말단자주억제전체구역、단백매、포안산부함결구역화C말단과립체단백결구역,동시,기단백매결구역포함1개목과류단백매가족보수적최화삼련체활성위점:Cys168-His304-Asn324.(3)분자계통발생분석증실,기여의남개적RD21일치성최고,속류RD21반광안산단백매류.(4)기인표체분석표명,FeRD21능피간한、고염、ABA화쇠로협박유도.
