畜牧与饲料科学
畜牧與飼料科學
축목여사료과학
ANIMAL HUSBANDRY AND FEED SCIENCE
2015年
2期
32-35
,共4页
王宇菲%陈超阳%王鑫%夏铭崎%武华
王宇菲%陳超暘%王鑫%夏銘崎%武華
왕우비%진초양%왕흠%하명기%무화
猪繁殖与呼吸综合征病毒%RT-PCR%鉴别诊断
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%RT-PCR%鑒彆診斷
저번식여호흡종합정병독%RT-PCR%감별진단
根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株(LP-PRRSV CH-1a)、高致病性株(HP-PRRSV TJ)及疫苗株(HP-PRRSV TJM-F92)的Nsp2基因核苷酸序列,设计2对特异性引物1st和2nd,建立鉴别 LP-PRRSV、HP-PRRSV与HP-PRRSV TJM-F92的RT-PCR检澳方法.用引物1st对LP-PRRSV、HP-PRRSV与HP-PRRSVTJM-F92进行RT-PCR扩增,分别扩增587、497和497 bp的特异性片段;用引物2nd对HP-PRRSV与HP-PRRSV TJM-F92进行RT-PCR扩增,分别扩增1 004和644 bp的特异性片段,结合两步RT-PCR扩增结果可达到区分3者的目的;对RT-PCR的特异性、敏感性、重复性进行评价.结果表明,建立的RT-PCR检测方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点,可用于LP-PRRSV、HP-PRRSV与HP-PRRSV TJM-F92的鉴别诊断.
根據GenBank公佈的豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒經典株(LP-PRRSV CH-1a)、高緻病性株(HP-PRRSV TJ)及疫苗株(HP-PRRSV TJM-F92)的Nsp2基因覈苷痠序列,設計2對特異性引物1st和2nd,建立鑒彆 LP-PRRSV、HP-PRRSV與HP-PRRSV TJM-F92的RT-PCR檢澳方法.用引物1st對LP-PRRSV、HP-PRRSV與HP-PRRSVTJM-F92進行RT-PCR擴增,分彆擴增587、497和497 bp的特異性片段;用引物2nd對HP-PRRSV與HP-PRRSV TJM-F92進行RT-PCR擴增,分彆擴增1 004和644 bp的特異性片段,結閤兩步RT-PCR擴增結果可達到區分3者的目的;對RT-PCR的特異性、敏感性、重複性進行評價.結果錶明,建立的RT-PCR檢測方法具有特異性彊、敏感性高、重複性好的特點,可用于LP-PRRSV、HP-PRRSV與HP-PRRSV TJM-F92的鑒彆診斷.
근거GenBank공포적저번식여호흡종합정병독경전주(LP-PRRSV CH-1a)、고치병성주(HP-PRRSV TJ)급역묘주(HP-PRRSV TJM-F92)적Nsp2기인핵감산서렬,설계2대특이성인물1st화2nd,건립감별 LP-PRRSV、HP-PRRSV여HP-PRRSV TJM-F92적RT-PCR검오방법.용인물1st대LP-PRRSV、HP-PRRSV여HP-PRRSVTJM-F92진행RT-PCR확증,분별확증587、497화497 bp적특이성편단;용인물2nd대HP-PRRSV여HP-PRRSV TJM-F92진행RT-PCR확증,분별확증1 004화644 bp적특이성편단,결합량보RT-PCR확증결과가체도구분3자적목적;대RT-PCR적특이성、민감성、중복성진행평개.결과표명,건립적RT-PCR검측방법구유특이성강、민감성고、중복성호적특점,가용우LP-PRRSV、HP-PRRSV여HP-PRRSV TJM-F92적감별진단.