植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2014年
3期
232-238
,共7页
成春燕%杨威%甘永亮%蒋国凤%杨丽超%阳丽艳%姜伯乐
成春燕%楊威%甘永亮%蔣國鳳%楊麗超%暘麗豔%薑伯樂
성춘연%양위%감영량%장국봉%양려초%양려염%강백악
十字花科黑腐病菌%Ⅲ型效应物%cyaA%3×FLAG%pJAA
十字花科黑腐病菌%Ⅲ型效應物%cyaA%3×FLAG%pJAA
십자화과흑부병균%Ⅲ형효응물%cyaA%3×FLAG%pJAA
Xanthomonas campestris pv.campestris%type Ⅲ effector%cyaA%3×FLAG%pJAA
通过免疫检测的方法鉴定十字花科黑腐病菌(Xcc)Ⅲ型效应物的分泌和转运,将cyaA基因克隆至带有3×FLAG的pJXG载体上,构建带有3×FLAG和cyaA基因的报告质粒pJAA,并用已鉴定为Ⅲ型效应物的XC_1553启动子区信号区验证该报告质粒.将pJAA1553三亲导人Xcc 8004*和8004*△hrcV,然后通过Westemblotting免疫检测XC_1553的分泌,结果在8004 */pJAA1553的胞外蛋白中检测到了XC_1553的分泌,而在8004*△hrcV/pJAA1553的胞外蛋白中没有检测到XC_1553的分泌.通过免疫反应定量检测8004*/pJAA1553和8004*△hrcV/pJAA1553侵染后植物体内的cAMP含量,结果发现8004*/pJAA1553侵染后植物体内的cAMP含量比8004* △hrcV/pJAA1553侵染后植物体内的cAMP含量高15倍.结果表明,报告质粒pJAA能够应用于鉴定十字花科黑腐病菌的Ⅲ型效应物.
通過免疫檢測的方法鑒定十字花科黑腐病菌(Xcc)Ⅲ型效應物的分泌和轉運,將cyaA基因剋隆至帶有3×FLAG的pJXG載體上,構建帶有3×FLAG和cyaA基因的報告質粒pJAA,併用已鑒定為Ⅲ型效應物的XC_1553啟動子區信號區驗證該報告質粒.將pJAA1553三親導人Xcc 8004*和8004*△hrcV,然後通過Westemblotting免疫檢測XC_1553的分泌,結果在8004 */pJAA1553的胞外蛋白中檢測到瞭XC_1553的分泌,而在8004*△hrcV/pJAA1553的胞外蛋白中沒有檢測到XC_1553的分泌.通過免疫反應定量檢測8004*/pJAA1553和8004*△hrcV/pJAA1553侵染後植物體內的cAMP含量,結果髮現8004*/pJAA1553侵染後植物體內的cAMP含量比8004* △hrcV/pJAA1553侵染後植物體內的cAMP含量高15倍.結果錶明,報告質粒pJAA能夠應用于鑒定十字花科黑腐病菌的Ⅲ型效應物.
통과면역검측적방법감정십자화과흑부병균(Xcc)Ⅲ형효응물적분비화전운,장cyaA기인극륭지대유3×FLAG적pJXG재체상,구건대유3×FLAG화cyaA기인적보고질립pJAA,병용이감정위Ⅲ형효응물적XC_1553계동자구신호구험증해보고질립.장pJAA1553삼친도인Xcc 8004*화8004*△hrcV,연후통과Westemblotting면역검측XC_1553적분비,결과재8004 */pJAA1553적포외단백중검측도료XC_1553적분비,이재8004*△hrcV/pJAA1553적포외단백중몰유검측도XC_1553적분비.통과면역반응정량검측8004*/pJAA1553화8004*△hrcV/pJAA1553침염후식물체내적cAMP함량,결과발현8004*/pJAA1553침염후식물체내적cAMP함량비8004* △hrcV/pJAA1553침염후식물체내적cAMP함량고15배.결과표명,보고질립pJAA능구응용우감정십자화과흑부병균적Ⅲ형효응물.
