植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2015年
2期
151-157
,共7页
刘维振%陈华民%于清%田芳%唐嘉义%何晨阳
劉維振%陳華民%于清%田芳%唐嘉義%何晨暘
류유진%진화민%우청%전방%당가의%하신양
番茄细菌性斑点病菌%鞭毛素%病原相关分子模式%水稻%免疫反应
番茄細菌性斑點病菌%鞭毛素%病原相關分子模式%水稻%免疫反應
번가세균성반점병균%편모소%병원상관분자모식%수도%면역반응
Xanthomonas campestris pv.vesicatoria%flagellin%PAMPs%rice%immunity response
为揭示来源于番茄细菌性斑点病菌(Xanthomonas campestris pv.vesicatoria,Xcv)菌株XV18鞭毛素(FliCxcv)作为一种病原相关分子模式(PAMP)诱导水稻免疫反应的功能,本研究对FliCxcv编码基因flicxcv进行了基因克隆、序列分析、原核表达、蛋白纯化和诱导活性测定.结果表明,通过PCR特异性扩增,从Xcv菌株XV18中克隆了1 200bp的fliCxcv基因片段,其序列与GenBank中己测序菌株的完全一致.在大肠杆菌中对该基因全长、N端和C端截短序列进行了原核表达,并获得了纯化的FliCxcv全长及其截短蛋白.将纯化蛋白浸润接种到水稻品种日本晴叶片组织,发现FliCxcv全长及其截短蛋白均能诱导水稻叶片细胞死亡、H2O2产生以及防卫基因(OsPAL和OsPR1b)表达等免疫反应,但诱导活性存在差异.因此,本研究验证了FliCxcv具有激发水稻细胞免疫反应的PAMP功能,为水稻免疫诱导制剂的研发提供了材料.
為揭示來源于番茄細菌性斑點病菌(Xanthomonas campestris pv.vesicatoria,Xcv)菌株XV18鞭毛素(FliCxcv)作為一種病原相關分子模式(PAMP)誘導水稻免疫反應的功能,本研究對FliCxcv編碼基因flicxcv進行瞭基因剋隆、序列分析、原覈錶達、蛋白純化和誘導活性測定.結果錶明,通過PCR特異性擴增,從Xcv菌株XV18中剋隆瞭1 200bp的fliCxcv基因片段,其序列與GenBank中己測序菌株的完全一緻.在大腸桿菌中對該基因全長、N耑和C耑截短序列進行瞭原覈錶達,併穫得瞭純化的FliCxcv全長及其截短蛋白.將純化蛋白浸潤接種到水稻品種日本晴葉片組織,髮現FliCxcv全長及其截短蛋白均能誘導水稻葉片細胞死亡、H2O2產生以及防衛基因(OsPAL和OsPR1b)錶達等免疫反應,但誘導活性存在差異.因此,本研究驗證瞭FliCxcv具有激髮水稻細胞免疫反應的PAMP功能,為水稻免疫誘導製劑的研髮提供瞭材料.
위게시래원우번가세균성반점병균(Xanthomonas campestris pv.vesicatoria,Xcv)균주XV18편모소(FliCxcv)작위일충병원상관분자모식(PAMP)유도수도면역반응적공능,본연구대FliCxcv편마기인flicxcv진행료기인극륭、서렬분석、원핵표체、단백순화화유도활성측정.결과표명,통과PCR특이성확증,종Xcv균주XV18중극륭료1 200bp적fliCxcv기인편단,기서렬여GenBank중기측서균주적완전일치.재대장간균중대해기인전장、N단화C단절단서렬진행료원핵표체,병획득료순화적FliCxcv전장급기절단단백.장순화단백침윤접충도수도품충일본청협편조직,발현FliCxcv전장급기절단단백균능유도수도협편세포사망、H2O2산생이급방위기인(OsPAL화OsPR1b)표체등면역반응,단유도활성존재차이.인차,본연구험증료FliCxcv구유격발수도세포면역반응적PAMP공능,위수도면역유도제제적연발제공료재료.