植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2014年
5期
497-503
,共7页
王军娟%陶飞%安菲%徐向明%胡小平
王軍娟%陶飛%安菲%徐嚮明%鬍小平
왕군연%도비%안비%서향명%호소평
内参基因%小麦%条锈病菌%温度%实时荧光定量PCR
內參基因%小麥%條鏽病菌%溫度%實時熒光定量PCR
내삼기인%소맥%조수병균%온도%실시형광정량PCR
reference gene%wheat%Puccinia striiformis f.sp.tritici%temperature%SYBR Green Ⅰ Real-time PCR
选择合适的内参基因是采用实时定量PCR研究基因表达获得可信数据的关键.以小麦在条锈病菌及温度双因素胁迫为研究对象,采用实时荧光定量PCR评价了CDC、RLI、A CTIN和26S基因的表达情况,采用geNorm和NormFinder软件进行了比较分析.结果表明,小偃6号小麦在常温(15℃±1℃)未接种条锈病菌,以及接种条锈病菌并培育至花斑期分别在高温(20℃±1℃)、变温(20℃到15℃)条件处理中,基因RLI表达不稳定,基因ACTIN在常温条件下以及在条锈病菌及高温处理条件下的表达量相对稳定,但在变温条件下波动较大.表达最稳定的基因是26S,其次是CDC基因,它们可以作为小偃6号-CYR32-温度互作体系中基因表达实时荧光定量PCR研究的内参基因,26S和CDC是最佳内参基因组合.
選擇閤適的內參基因是採用實時定量PCR研究基因錶達穫得可信數據的關鍵.以小麥在條鏽病菌及溫度雙因素脅迫為研究對象,採用實時熒光定量PCR評價瞭CDC、RLI、A CTIN和26S基因的錶達情況,採用geNorm和NormFinder軟件進行瞭比較分析.結果錶明,小偃6號小麥在常溫(15℃±1℃)未接種條鏽病菌,以及接種條鏽病菌併培育至花斑期分彆在高溫(20℃±1℃)、變溫(20℃到15℃)條件處理中,基因RLI錶達不穩定,基因ACTIN在常溫條件下以及在條鏽病菌及高溫處理條件下的錶達量相對穩定,但在變溫條件下波動較大.錶達最穩定的基因是26S,其次是CDC基因,它們可以作為小偃6號-CYR32-溫度互作體繫中基因錶達實時熒光定量PCR研究的內參基因,26S和CDC是最佳內參基因組閤.
선택합괄적내삼기인시채용실시정량PCR연구기인표체획득가신수거적관건.이소맥재조수병균급온도쌍인소협박위연구대상,채용실시형광정량PCR평개료CDC、RLI、A CTIN화26S기인적표체정황,채용geNorm화NormFinder연건진행료비교분석.결과표명,소언6호소맥재상온(15℃±1℃)미접충조수병균,이급접충조수병균병배육지화반기분별재고온(20℃±1℃)、변온(20℃도15℃)조건처리중,기인RLI표체불은정,기인ACTIN재상온조건하이급재조수병균급고온처리조건하적표체량상대은정,단재변온조건하파동교대.표체최은정적기인시26S,기차시CDC기인,타문가이작위소언6호-CYR32-온도호작체계중기인표체실시형광정량PCR연구적내삼기인,26S화CDC시최가내삼기인조합.
