植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2014年
4期
363-369
,共7页
朱云聪%邓宇芳%何顺%罗来鑫%曹永松
硃雲聰%鄧宇芳%何順%囉來鑫%曹永鬆
주운총%산우방%하순%라래흠%조영송
番茄黄花曲叶病毒%实时荧光PCR%DNA含量%累积
番茄黃花麯葉病毒%實時熒光PCR%DNA含量%纍積
번가황화곡협병독%실시형광PCR%DNA함량%루적
Tomato yellow leaf curl virus%real-time PCR%DNA quantity%accumulation
本研究根据番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)分离物-SH2基因组序列,设计了一对引物,以番茄25S rRNA基因为内参,建立了番茄黄化曲叶病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法.该方法可检测到浓度为4.64×10-7 ng/μL的植物DNA中含有TYLCV,其灵敏度是常规PCR的1 000倍.利用该方法,研究了温室条件下以侵染性克隆接种TYLCV后的番茄植株中病毒DNA含量的变化情况.根、茎、叶中病毒DNA定量检测结果表明,TYLCV在3种植物器官中都呈现一个上升、稳定和下降的变化规律;病毒DNA在植株根部最早累积,累积的速度较慢,在叶部和茎部累积较快;叶部和茎部接种18 d后病毒DNA含量达到稳定期;在不同的器官中,病毒的含量不同,在茎部的含量最高,接种33 d后茎部病毒DNA的含量约为根部的100倍.本研究通过对TYLCV含量的动态监测,明确了病毒DNA在番茄植株中的累积和变化规律,为研究TYLCV侵染机制、病毒与寄主互作及病害防治提供了理论依据.
本研究根據番茄黃化麯葉病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)分離物-SH2基因組序列,設計瞭一對引物,以番茄25S rRNA基因為內參,建立瞭番茄黃化麯葉病毒SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR檢測方法.該方法可檢測到濃度為4.64×10-7 ng/μL的植物DNA中含有TYLCV,其靈敏度是常規PCR的1 000倍.利用該方法,研究瞭溫室條件下以侵染性剋隆接種TYLCV後的番茄植株中病毒DNA含量的變化情況.根、莖、葉中病毒DNA定量檢測結果錶明,TYLCV在3種植物器官中都呈現一箇上升、穩定和下降的變化規律;病毒DNA在植株根部最早纍積,纍積的速度較慢,在葉部和莖部纍積較快;葉部和莖部接種18 d後病毒DNA含量達到穩定期;在不同的器官中,病毒的含量不同,在莖部的含量最高,接種33 d後莖部病毒DNA的含量約為根部的100倍.本研究通過對TYLCV含量的動態鑑測,明確瞭病毒DNA在番茄植株中的纍積和變化規律,為研究TYLCV侵染機製、病毒與寄主互作及病害防治提供瞭理論依據.
본연구근거번가황화곡협병독(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)분리물-SH2기인조서렬,설계료일대인물,이번가25S rRNA기인위내삼,건립료번가황화곡협병독SYBR Green Ⅰ실시형광정량PCR검측방법.해방법가검측도농도위4.64×10-7 ng/μL적식물DNA중함유TYLCV,기령민도시상규PCR적1 000배.이용해방법,연구료온실조건하이침염성극륭접충TYLCV후적번가식주중병독DNA함량적변화정황.근、경、협중병독DNA정량검측결과표명,TYLCV재3충식물기관중도정현일개상승、은정화하강적변화규률;병독DNA재식주근부최조루적,루적적속도교만,재협부화경부루적교쾌;협부화경부접충18 d후병독DNA함량체도은정기;재불동적기관중,병독적함량불동,재경부적함량최고,접충33 d후경부병독DNA적함량약위근부적100배.본연구통과대TYLCV함량적동태감측,명학료병독DNA재번가식주중적루적화변화규률,위연구TYLCV침염궤제、병독여기주호작급병해방치제공료이론의거.
