基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2015年
4期
480-484
,共5页
贾倩楠%赵丽丽%邓涛%曹萌萌
賈倩楠%趙麗麗%鄧濤%曹萌萌
가천남%조려려%산도%조맹맹
禽流感病毒%反向遗传学%复制特性
禽流感病毒%反嚮遺傳學%複製特性
금류감병독%반향유전학%복제특성
avian influenza virus%reverse genetics%replication property
目的 利用反向遗传学技术构建具有感染性的H9N2亚型禽流感病毒,并揭示其在不同细胞中的复制特性.方法 以A/Quail/HongKong/Gl/97(H9N2)禽流感病毒基因组RNA为模板,用RT-PCR技术获得该病毒的8条完整基因片段,并分别将它们插入到pHW2000载体上,最终在293T细胞中包装产生重组H9N2病毒.并将重组的H9N2病毒感染不同细胞,观察病毒在不同细胞上的增殖状况来揭示该病毒在不同细胞上的复制特性.结果 应用流感病毒8质粒反向遗传学技术,成功获得重组病毒,并揭示了该毒株在不同细胞(A549,MDCK,Vero)中的复制特性,发现A549人肺腺癌细胞更适宜H9N2病毒的正常复制.此外还分析总结了该毒株的与病毒毒力相关的重要位点特征.结论 成功建立了H9N2禽流感病毒的反向遗传系统,该系统的建立为在分子水平研究H9N2病毒以及制备H9N2禽流感疫苗提供了依据.
目的 利用反嚮遺傳學技術構建具有感染性的H9N2亞型禽流感病毒,併揭示其在不同細胞中的複製特性.方法 以A/Quail/HongKong/Gl/97(H9N2)禽流感病毒基因組RNA為模闆,用RT-PCR技術穫得該病毒的8條完整基因片段,併分彆將它們插入到pHW2000載體上,最終在293T細胞中包裝產生重組H9N2病毒.併將重組的H9N2病毒感染不同細胞,觀察病毒在不同細胞上的增殖狀況來揭示該病毒在不同細胞上的複製特性.結果 應用流感病毒8質粒反嚮遺傳學技術,成功穫得重組病毒,併揭示瞭該毒株在不同細胞(A549,MDCK,Vero)中的複製特性,髮現A549人肺腺癌細胞更適宜H9N2病毒的正常複製.此外還分析總結瞭該毒株的與病毒毒力相關的重要位點特徵.結論 成功建立瞭H9N2禽流感病毒的反嚮遺傳繫統,該繫統的建立為在分子水平研究H9N2病毒以及製備H9N2禽流感疫苗提供瞭依據.
목적 이용반향유전학기술구건구유감염성적H9N2아형금류감병독,병게시기재불동세포중적복제특성.방법 이A/Quail/HongKong/Gl/97(H9N2)금류감병독기인조RNA위모판,용RT-PCR기술획득해병독적8조완정기인편단,병분별장타문삽입도pHW2000재체상,최종재293T세포중포장산생중조H9N2병독.병장중조적H9N2병독감염불동세포,관찰병독재불동세포상적증식상황래게시해병독재불동세포상적복제특성.결과 응용류감병독8질립반향유전학기술,성공획득중조병독,병게시료해독주재불동세포(A549,MDCK,Vero)중적복제특성,발현A549인폐선암세포경괄의H9N2병독적정상복제.차외환분석총결료해독주적여병독독력상관적중요위점특정.결론 성공건립료H9N2금류감병독적반향유전계통,해계통적건립위재분자수평연구H9N2병독이급제비H9N2금류감역묘제공료의거.