广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2015年
5期
660-663,664
,共5页
张绪慧%梁磊%蔡长青%汤新跃
張緒慧%樑磊%蔡長青%湯新躍
장서혜%량뢰%채장청%탕신약
氧化槐果碱%结肠癌%SW480%凋亡%细胞周期
氧化槐果堿%結腸癌%SW480%凋亡%細胞週期
양화괴과감%결장암%SW480%조망%세포주기
oxysophocarpine%carcinoma of colon%SW480%apoptosis%cell cycle
目的:观察氧化槐果碱(OSC)对人结肠腺癌细胞株 SW480的增殖抑制及诱导凋亡的作用,探讨其作用机制。方法体外培养 SW480细胞,使用 OSC(作用浓度分别为0.5~2 mg/mL)和阳性对照药5-氟尿嘧啶(作用浓度10μg/mL)作用于细胞12~48 h;采用 MTT 法测定 SW480细胞增殖情况,荧光双染观察细胞形态变化,计数凋亡细胞所占比例,流式细胞仪分析细胞周期变化及细胞凋亡率,Real -time PCR 检测凋亡基因 Caspase -3和 Bcl -2的表达。结果MTT 结果显示,各浓度 OSC 对体外培养的 SW480细胞增殖具有明显抑制作用,该作用呈一定的时间和剂量依赖性;OSC 作用后细胞的体积变小变圆,核变形、皱缩,凋亡细胞所占比例显著增加;流式细胞仪分析结果表明,随着 OSC 作用时间的延长,G0/G1期细胞比例增加,同时 S 期细胞比例也相应增加;凋亡基因 Caspase -3 mRNA 表达上调,Bcl -2 mRNA 表达下调。结论OSC 可抑制体外培养的 SW480细胞生长增殖,其作用机制与阻滞细胞周期进程、诱导细胞凋亡有关。
目的:觀察氧化槐果堿(OSC)對人結腸腺癌細胞株 SW480的增殖抑製及誘導凋亡的作用,探討其作用機製。方法體外培養 SW480細胞,使用 OSC(作用濃度分彆為0.5~2 mg/mL)和暘性對照藥5-氟尿嘧啶(作用濃度10μg/mL)作用于細胞12~48 h;採用 MTT 法測定 SW480細胞增殖情況,熒光雙染觀察細胞形態變化,計數凋亡細胞所佔比例,流式細胞儀分析細胞週期變化及細胞凋亡率,Real -time PCR 檢測凋亡基因 Caspase -3和 Bcl -2的錶達。結果MTT 結果顯示,各濃度 OSC 對體外培養的 SW480細胞增殖具有明顯抑製作用,該作用呈一定的時間和劑量依賴性;OSC 作用後細胞的體積變小變圓,覈變形、皺縮,凋亡細胞所佔比例顯著增加;流式細胞儀分析結果錶明,隨著 OSC 作用時間的延長,G0/G1期細胞比例增加,同時 S 期細胞比例也相應增加;凋亡基因 Caspase -3 mRNA 錶達上調,Bcl -2 mRNA 錶達下調。結論OSC 可抑製體外培養的 SW480細胞生長增殖,其作用機製與阻滯細胞週期進程、誘導細胞凋亡有關。
목적:관찰양화괴과감(OSC)대인결장선암세포주 SW480적증식억제급유도조망적작용,탐토기작용궤제。방법체외배양 SW480세포,사용 OSC(작용농도분별위0.5~2 mg/mL)화양성대조약5-불뇨밀정(작용농도10μg/mL)작용우세포12~48 h;채용 MTT 법측정 SW480세포증식정황,형광쌍염관찰세포형태변화,계수조망세포소점비례,류식세포의분석세포주기변화급세포조망솔,Real -time PCR 검측조망기인 Caspase -3화 Bcl -2적표체。결과MTT 결과현시,각농도 OSC 대체외배양적 SW480세포증식구유명현억제작용,해작용정일정적시간화제량의뢰성;OSC 작용후세포적체적변소변원,핵변형、추축,조망세포소점비례현저증가;류식세포의분석결과표명,수착 OSC 작용시간적연장,G0/G1기세포비례증가,동시 S 기세포비례야상응증가;조망기인 Caspase -3 mRNA 표체상조,Bcl -2 mRNA 표체하조。결론OSC 가억제체외배양적 SW480세포생장증식,기작용궤제여조체세포주기진정、유도세포조망유관。
Objective To investigate the inhibition of oxysophocarpine (OSC) on proliferation of human colon cancer cell line SW480 and induction on apoptosis , and to explore its mechanism.Methods SW480 cells were treated with OSC (0.5 -2 mg/mL) and the positive control drug 5 -fluorouracil (10 μg/mL) for 12 -48 h.MTT assay was used to detect the proliferation of SW480 cells; fluorescence double staining was used to observe the changes in cell mor -phology and the ratio of apoptotic cells ; flow cytometry was used to demonstrate the presence of apoptosis ; and real -time PCR detection was used to demonstrate changes in gene Caspase -3 and Bcl -2 expression.Results The results of MTT showed that OSC significantly inhibited the growth of SW 480 cells in dose -and time -dependent manners, and morpho-logical characteristics of apoptosis were also observed .The percentages of the G 0 /G1 phase and the S phase cells were in-creased after treated by OSC.Apoptosis and G0 /G1 arrest were induced by OCS in SW480 cells.Apoptotic gene Caspase -3 mRNA was up -regulated, while Bcl -2 mRNA down -regulated.Conclusion OSC inhibits the proliferation of SW480 cells in vitro, involving arrest of cell cycle progression and apoptosis .