中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2015年
1期
71-75
,共5页
王雁%汤纳平%惠涛涛%富欣%李华%杨琛懋%周国民%马璟
王雁%湯納平%惠濤濤%富訢%李華%楊琛懋%週國民%馬璟
왕안%탕납평%혜도도%부흔%리화%양침무%주국민%마경
氯胺酮%HepG2细胞%线粒体%药物毒性
氯胺酮%HepG2細胞%線粒體%藥物毒性
록알동%HepG2세포%선립체%약물독성
ketamine%HepG2 cells%mitochondrial%drug toxicity
目的 评价氯胺酮的线粒体毒性,从而探讨氯胺酮可能的毒性机制.方法 HepG2细胞培养基中分别加入齐多夫定10～2000 μmol·L-1培养7d,或加入氯胺酮50～3000 μmol·L-1培养24 h,CCK8细胞计数法测定细胞存活率.HepG2细胞培养基中分别加入齐多夫定100 μmol· L-1培养7d后,或加入氯胺酮100和1200 μmol·L-1培养24 h,化学发光法检测胞内ATP合成水平,荧光探针法检测胞内钙离子浓度、活性氧及线粒体膜电位(△Ψm)的变化,同时设齐多夫定1000 μmol· L-1用于实时荧光定量PCR检测线粒体DNA(mtDNA)表达水平的变化.结果 与正常对照组相比,齐多夫定10～ 2000 μmol· L-1可以抑制细胞存活,IC50为100 μmol·L-1;氯胺酮1000～ 3000 μmol· L-1抑制细胞存活,IC50为1200 μmol·L-1.与正常对照组相比,齐多夫定100 μmol·L-1组线粒体ATP合成水平显著下降(P＜0.05),胞内钙离子浓度明显升高(P＜0.05),活性氧水平显著升高(P＜0.05),△Ψm显著下降(P＜0.05),而1000 μmol· L-1可以明显干扰mtDNA表达水平(P＜0.05).氯胺酮100 μmol· L-1组ATP合成水平明显下降(P＜0.05),其他指标均无显著性差异;氯胺酮1200 μmol·L-1组ATP合成水平显著下降(P＜0.01),活性氧水平和胞内钙离子浓度显著升高(P＜0.01),△Ψm显著下降(P＜0.05),mtDNA水平无明显改变.结论 氯胺酮可以通过干扰线粒体代谢功能而诱导线粒体损伤.
目的 評價氯胺酮的線粒體毒性,從而探討氯胺酮可能的毒性機製.方法 HepG2細胞培養基中分彆加入齊多伕定10～2000 μmol·L-1培養7d,或加入氯胺酮50～3000 μmol·L-1培養24 h,CCK8細胞計數法測定細胞存活率.HepG2細胞培養基中分彆加入齊多伕定100 μmol· L-1培養7d後,或加入氯胺酮100和1200 μmol·L-1培養24 h,化學髮光法檢測胞內ATP閤成水平,熒光探針法檢測胞內鈣離子濃度、活性氧及線粒體膜電位(△Ψm)的變化,同時設齊多伕定1000 μmol· L-1用于實時熒光定量PCR檢測線粒體DNA(mtDNA)錶達水平的變化.結果 與正常對照組相比,齊多伕定10～ 2000 μmol· L-1可以抑製細胞存活,IC50為100 μmol·L-1;氯胺酮1000～ 3000 μmol· L-1抑製細胞存活,IC50為1200 μmol·L-1.與正常對照組相比,齊多伕定100 μmol·L-1組線粒體ATP閤成水平顯著下降(P＜0.05),胞內鈣離子濃度明顯升高(P＜0.05),活性氧水平顯著升高(P＜0.05),△Ψm顯著下降(P＜0.05),而1000 μmol· L-1可以明顯榦擾mtDNA錶達水平(P＜0.05).氯胺酮100 μmol· L-1組ATP閤成水平明顯下降(P＜0.05),其他指標均無顯著性差異;氯胺酮1200 μmol·L-1組ATP閤成水平顯著下降(P＜0.01),活性氧水平和胞內鈣離子濃度顯著升高(P＜0.01),△Ψm顯著下降(P＜0.05),mtDNA水平無明顯改變.結論 氯胺酮可以通過榦擾線粒體代謝功能而誘導線粒體損傷.
목적 평개록알동적선립체독성,종이탐토록알동가능적독성궤제.방법 HepG2세포배양기중분별가입제다부정10～2000 μmol·L-1배양7d,혹가입록알동50～3000 μmol·L-1배양24 h,CCK8세포계수법측정세포존활솔.HepG2세포배양기중분별가입제다부정100 μmol· L-1배양7d후,혹가입록알동100화1200 μmol·L-1배양24 h,화학발광법검측포내ATP합성수평,형광탐침법검측포내개리자농도、활성양급선립체막전위(△Ψm)적변화,동시설제다부정1000 μmol· L-1용우실시형광정량PCR검측선립체DNA(mtDNA)표체수평적변화.결과 여정상대조조상비,제다부정10～ 2000 μmol· L-1가이억제세포존활,IC50위100 μmol·L-1;록알동1000～ 3000 μmol· L-1억제세포존활,IC50위1200 μmol·L-1.여정상대조조상비,제다부정100 μmol·L-1조선립체ATP합성수평현저하강(P＜0.05),포내개리자농도명현승고(P＜0.05),활성양수평현저승고(P＜0.05),△Ψm현저하강(P＜0.05),이1000 μmol· L-1가이명현간우mtDNA표체수평(P＜0.05).록알동100 μmol· L-1조ATP합성수평명현하강(P＜0.05),기타지표균무현저성차이;록알동1200 μmol·L-1조ATP합성수평현저하강(P＜0.01),활성양수평화포내개리자농도현저승고(P＜0.01),△Ψm현저하강(P＜0.05),mtDNA수평무명현개변.결론 록알동가이통과간우선립체대사공능이유도선립체손상.
