中国生物防治学报
中國生物防治學報
중국생물방치학보
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICAL CONTROL
2015年
1期
48-56
,共9页
杜琴%辛肇军%杨子威%李喜旺%陈宗懋%孙晓玲
杜琴%辛肇軍%楊子威%李喜旺%陳宗懋%孫曉玲
두금%신조군%양자위%리희왕%진종무%손효령
茶尺蠖%脂肪酶%基因克隆%表达谱
茶呎蠖%脂肪酶%基因剋隆%錶達譜
다척확%지방매%기인극륭%표체보
Ectropis oblique%lipase%gene clone%expression analysis
昆虫脂肪酶可参与脂类消化、吸收和运输,并能介导植物的抗病虫功能.本研究通过茶尺蠖唾液腺转录组数据库发掘到该基因片段,采用RACE技术克隆获得了一条茶尺蠖脂肪酶合成基因序列,命名为EoL2,并检测了其在茶尺蠖不同生育期及不同组织部位中的相对表达水平.研究结果表明,EoL2的cDNA序列全长1310 bp,开放阅读框为1041 bp,编码一个包含346个氨基酸的蛋白,推测该蛋白相对分子量为37.96 kD,推测等电点(PI)为8.41,具有脂肪酶典型的GXSXG丝氨酸活性保守序列,其氨基酸序列与家蚕相似度最高,为57％.实时荧光定量PCR结果表明,EoL2在卵中的表达量显著低于其它虫态;在1龄幼虫期的相对表达水平显著高于2～5龄;在成虫中的表达量显著高于蛹;在血淋巴中的表达量显著高于中肠、表皮、脂肪体和唾液腺.
昆蟲脂肪酶可參與脂類消化、吸收和運輸,併能介導植物的抗病蟲功能.本研究通過茶呎蠖唾液腺轉錄組數據庫髮掘到該基因片段,採用RACE技術剋隆穫得瞭一條茶呎蠖脂肪酶閤成基因序列,命名為EoL2,併檢測瞭其在茶呎蠖不同生育期及不同組織部位中的相對錶達水平.研究結果錶明,EoL2的cDNA序列全長1310 bp,開放閱讀框為1041 bp,編碼一箇包含346箇氨基痠的蛋白,推測該蛋白相對分子量為37.96 kD,推測等電點(PI)為8.41,具有脂肪酶典型的GXSXG絲氨痠活性保守序列,其氨基痠序列與傢蠶相似度最高,為57％.實時熒光定量PCR結果錶明,EoL2在卵中的錶達量顯著低于其它蟲態;在1齡幼蟲期的相對錶達水平顯著高于2～5齡;在成蟲中的錶達量顯著高于蛹;在血淋巴中的錶達量顯著高于中腸、錶皮、脂肪體和唾液腺.
곤충지방매가삼여지류소화、흡수화운수,병능개도식물적항병충공능.본연구통과다척확타액선전록조수거고발굴도해기인편단,채용RACE기술극륭획득료일조다척확지방매합성기인서렬,명명위EoL2,병검측료기재다척확불동생육기급불동조직부위중적상대표체수평.연구결과표명,EoL2적cDNA서렬전장1310 bp,개방열독광위1041 bp,편마일개포함346개안기산적단백,추측해단백상대분자량위37.96 kD,추측등전점(PI)위8.41,구유지방매전형적GXSXG사안산활성보수서렬,기안기산서렬여가잠상사도최고,위57％.실시형광정량PCR결과표명,EoL2재란중적표체량현저저우기타충태;재1령유충기적상대표체수평현저고우2～5령;재성충중적표체량현저고우용;재혈림파중적표체량현저고우중장、표피、지방체화타액선.
