CAJ | 학술논문

目的:研究甲嘎松汤对氧化应激损伤L-02的影响,并从Nrf2/Bach1-ARE抗氧化酶途径研究其抗氧化的机制.方法:MTT法评价建立葡萄糖氧化酶肝损伤细胞模型的方法.实验共分9组,分别为空白组,模型组,20％甲嘎松汤含药血清组,5 μmol·L-1全反式视黄酸(ATRA)组,80 μmol· L-1染料木黄铜(Genstein)组,80 μmol·L-1叔丁基对苯二酚(t-BHQ)组,t-BHQ+ 20％甲嘎松汤含药血清组,ATRA+ 20％甲嘎松汤含药血清组,Genstein+ 20％甲嘎松汤含药血清组,以正常培养液或含t-BHQ,ATRA,Genistein的培养液干预L-02细胞12 h,再用20％甲嘎松汤含药血清培养液预保护12h,最后采用100 U·L-1葡萄糖氧化酶制备氧化损伤模型.MTT法测定细胞活性,测定培养上清的丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,丙二醛(MDA)含量,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,利用免疫荧光法和Western blot法观察细胞内核因子相关因子(Nrf2)和转录因子BTB-CNC异体同源体(Bach1)的分布及核内两者的表达量.结果:与空白组比较,模型组ALT,AST活性及MDA含量明显升高,GSH-Px活性明显降低(P＜0.01),细胞核内Nrf2及Bach1的表达明显升高(P＜0.01);与模型组比较,甲嘎松汤能升高氧化损伤以及3种干预剂下的细胞活性和GSH-Px活性,降低ALT,AST活性及MDA含量(P ＜0.05,P＜0.01);可协同t-BHQ升高核内Nrf2表达,抑制ATRA降低核内Nrf2表达,抑制Genistein升高核内Nrf2表达,均具有统计学差异(P＜0.01);在3种干预剂作用下,甲嘎松汤可促进Bach1出核(P＜0.01).结论:甲嘎松汤可保护葡萄糖氧化酶诱导氧化应激损伤肝细胞,其抗氧化保肝作用与调节Nrf2与Bach1表位位置以及核内蛋白水平有关.
목적:연구갑알송탕대양화응격손상L-02적영향,병종Nrf2/Bach1-ARE항양화매도경연구기항양화적궤제.방법:MTT법평개건립포도당양화매간손상세포모형적방법.실험공분9조,분별위공백조,모형조,20％갑알송탕함약혈청조,5 μmol·L-1전반식시황산(ATRA)조,80 μmol· L-1염료목황동(Genstein)조,80 μmol·L-1숙정기대분이분(t-BHQ)조,t-BHQ+ 20％갑알송탕함약혈청조,ATRA+ 20％갑알송탕함약혈청조,Genstein+ 20％갑알송탕함약혈청조,이정상배양액혹함t-BHQ,ATRA,Genistein적배양액간예L-02세포12 h,재용20％갑알송탕함약혈청배양액예보호12h,최후채용100 U·L-1포도당양화매제비양화손상모형.MTT법측정세포활성,측정배양상청적병안산안기전이매(ALT),천문동안산안기전이매(AST)활성,병이철(MDA)함량,곡광감태과양화물매(GSH-Px)활성,이용면역형광법화Western blot법관찰세포내핵인자상관인자(Nrf2)화전록인자BTB-CNC이체동원체(Bach1)적분포급핵내량자적표체량.결과:여공백조비교,모형조ALT,AST활성급MDA함량명현승고,GSH-Px활성명현강저(P＜0.01),세포핵내Nrf2급Bach1적표체명현승고(P＜0.01);여모형조비교,갑알송탕능승고양화손상이급3충간예제하적세포활성화GSH-Px활성,강저ALT,AST활성급MDA함량(P ＜0.05,P＜0.01);가협동t-BHQ승고핵내Nrf2표체,억제ATRA강저핵내Nrf2표체,억제Genistein승고핵내Nrf2표체,균구유통계학차이(P＜0.01);재3충간예제작용하,갑알송탕가촉진Bach1출핵(P＜0.01).결론:갑알송탕가보호포도당양화매유도양화응격손상간세포,기항양화보간작용여조절Nrf2여Bach1표위위치이급핵내단백수평유관.