中国烟草学报
中國煙草學報
중국연초학보
ACTA TABACARIA SINICA
2015年
2期
39-39
,共1页
孙蔓莉%孟玉玲%张强%黄桂艳%单卫星
孫蔓莉%孟玉玲%張彊%黃桂豔%單衛星
손만리%맹옥령%장강%황계염%단위성
通过探究根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的烟草瞬时表达体系的影响因素,确定烟草瞬时表达的最佳条件,为目的基因的功能研究提供技术支持。利用马铃薯晚疫病抗性基因RB和致病疫霉菌效应基因Avrblb 1作为报告基因,采用农杆菌介导的注射渗透法,摸索农杆菌菌悬液OD600值和菌系(遗传背景)、烟草品种及其生长时期等因素,确定烟草高效的基因瞬时表达条件。研究结果表明:介导烟草基因瞬时表达的根癌农杆菌菌悬液适宜OD600值为0.3~0.8;在菌悬液OD600值为0.1及以上时,AGL1、GV3101和C58C1介导的报告基因瞬时表达效率相似,均引发较强的叶片坏死反应;在农杆菌菌悬液OD600值小于0.1时,AGL1介导的瞬时表达效率最高。测试的烟草品种都具备较高的瞬时表达效率,苗龄6~8周的烟草适合分析。通过测试农杆菌菌悬液OD600值和菌系(遗传背景)、烟草品种及其生长时期等因素,确定本氏烟和普通烟均可实现基因高效瞬时表达的条件。
通過探究根癌農桿菌(Agrobacterium tumefaciens)介導的煙草瞬時錶達體繫的影響因素,確定煙草瞬時錶達的最佳條件,為目的基因的功能研究提供技術支持。利用馬鈴藷晚疫病抗性基因RB和緻病疫黴菌效應基因Avrblb 1作為報告基因,採用農桿菌介導的註射滲透法,摸索農桿菌菌懸液OD600值和菌繫(遺傳揹景)、煙草品種及其生長時期等因素,確定煙草高效的基因瞬時錶達條件。研究結果錶明:介導煙草基因瞬時錶達的根癌農桿菌菌懸液適宜OD600值為0.3~0.8;在菌懸液OD600值為0.1及以上時,AGL1、GV3101和C58C1介導的報告基因瞬時錶達效率相似,均引髮較彊的葉片壞死反應;在農桿菌菌懸液OD600值小于0.1時,AGL1介導的瞬時錶達效率最高。測試的煙草品種都具備較高的瞬時錶達效率,苗齡6~8週的煙草適閤分析。通過測試農桿菌菌懸液OD600值和菌繫(遺傳揹景)、煙草品種及其生長時期等因素,確定本氏煙和普通煙均可實現基因高效瞬時錶達的條件。
통과탐구근암농간균(Agrobacterium tumefaciens)개도적연초순시표체체계적영향인소,학정연초순시표체적최가조건,위목적기인적공능연구제공기술지지。이용마령서만역병항성기인RB화치병역매균효응기인Avrblb 1작위보고기인,채용농간균개도적주사삼투법,모색농간균균현액OD600치화균계(유전배경)、연초품충급기생장시기등인소,학정연초고효적기인순시표체조건。연구결과표명:개도연초기인순시표체적근암농간균균현액괄의OD600치위0.3~0.8;재균현액OD600치위0.1급이상시,AGL1、GV3101화C58C1개도적보고기인순시표체효솔상사,균인발교강적협편배사반응;재농간균균현액OD600치소우0.1시,AGL1개도적순시표체효솔최고。측시적연초품충도구비교고적순시표체효솔,묘령6~8주적연초괄합분석。통과측시농간균균현액OD600치화균계(유전배경)、연초품충급기생장시기등인소,학정본씨연화보통연균가실현기인고효순시표체적조건。