CAJ | 학술논문

探索优化并构建S100A16原核表达载体、制备S100A16蛋白多克隆抗体的条件。试验方法为，将RT－PCR扩增得到的小鼠肝脏组织的S100A16基因克隆片段连接到带有His标签的原核表达载体pET－28a多克隆位点，并转化大肠杆菌BL21（DE3），用不同温度、不同浓度IPTG（异丙基－β－D－硫代半乳糖苷）诱导融合蛋白表达，通过亲和层析柱纯化获得纯化的蛋白质。经免疫动物得到His－S100A16抗血清，通过免疫亲和层析获得了具有高度特异性抗体，通过Western Blot和Elisa检测抗体的特异性和效价，结果表明，在温度25℃、IPTG浓度为0．2 mmol／L的条件下，可溶性蛋白的表达效果较好。
탐색우화병구건S100A16원핵표체재체、제비S100A16단백다극륭항체적조건。시험방법위，장RT－PCR확증득도적소서간장조직적S100A16기인극륭편단련접도대유His표첨적원핵표체재체pET－28a다극륭위점，병전화대장간균BL21（DE3），용불동온도、불동농도IPTG（이병기－β－D－류대반유당감）유도융합단백표체，통과친화층석주순화획득순화적단백질。경면역동물득도His－S100A16항혈청，통과면역친화층석획득료구유고도특이성항체，통과Western Blot화Elisa검측항체적특이성화효개，결과표명，재온도25℃、IPTG농도위0．2 mmol／L적조건하，가용성단백적표체효과교호。