国际肿瘤学杂志
國際腫瘤學雜誌
국제종류학잡지
JOURNAL OF INTERNATIONAL ONCOLOGY
2015年
4期
241-244
,共4页
冷政伟%杨刚%李勇%石刚
冷政偉%楊剛%李勇%石剛
랭정위%양강%리용%석강
肝肿瘤%肿瘤干细胞%信号传导%细胞球
肝腫瘤%腫瘤榦細胞%信號傳導%細胞毬
간종류%종류간세포%신호전도%세포구
Liver neoplasms%Neoplastic stem cells%Signal transduction%Spheroid cells
目的：探讨 LY294002对富集肝癌干细胞的细胞球增殖和磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶 B （PI3K-Akt）通路的影响。方法对人肝癌 HepG2细胞进行无血清悬浮培养获得富集肝癌干细胞的细胞球，消化后使用 LY294002（10、20、30μmol/ L）培养作为实验组，对照组不使用 LY294002。细胞活性计数法检测细胞增殖活性，Western blotting 检测 Akt，实时定量 PCR 检测 PI3K-Akt 信号通路下游基因诱骗受体3（DcR3）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、B 淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、细胞周期蛋白 D1（Cyclin D1）的表达。结果与对照组相比，30μmol/ L LY294002可显著抑制富集肝癌干细胞的细胞球增殖，吸光度（A）值有显著差异[（0.14±0.03）：（0.56±0.01），t =-8.915，P =0.000]；磷酸化 Akt 表达水平明显降低[（0.57±0.08）：（0.16±0.42），t =6.027，P =0.026]；DcR3[（0.38±0.08）：1，t =13.060， P =0.006]、mTOR[（0.37±0.04）：1，t =30.363，P =0.001]、Bcl-2[（0.26±0.04）：1，t =33.554，P =0.001]、Cyclin D1[（0.1±0.02）：1，t =63.528，P =0.000]表达明显减少。结论 LY294002可能通过抑制 PI3K-Akt 通路而抑制富集人肝癌干细胞的细胞球的增殖。
目的：探討 LY294002對富集肝癌榦細胞的細胞毬增殖和燐脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶 B （PI3K-Akt）通路的影響。方法對人肝癌 HepG2細胞進行無血清懸浮培養穫得富集肝癌榦細胞的細胞毬，消化後使用 LY294002（10、20、30μmol/ L）培養作為實驗組，對照組不使用 LY294002。細胞活性計數法檢測細胞增殖活性，Western blotting 檢測 Akt，實時定量 PCR 檢測 PI3K-Akt 信號通路下遊基因誘騙受體3（DcR3）、哺乳動物雷帕黴素靶蛋白（mTOR）、B 淋巴細胞瘤-2（Bcl-2）、細胞週期蛋白 D1（Cyclin D1）的錶達。結果與對照組相比，30μmol/ L LY294002可顯著抑製富集肝癌榦細胞的細胞毬增殖，吸光度（A）值有顯著差異[（0.14±0.03）：（0.56±0.01），t =-8.915，P =0.000]；燐痠化 Akt 錶達水平明顯降低[（0.57±0.08）：（0.16±0.42），t =6.027，P =0.026]；DcR3[（0.38±0.08）：1，t =13.060， P =0.006]、mTOR[（0.37±0.04）：1，t =30.363，P =0.001]、Bcl-2[（0.26±0.04）：1，t =33.554，P =0.001]、Cyclin D1[（0.1±0.02）：1，t =63.528，P =0.000]錶達明顯減少。結論 LY294002可能通過抑製 PI3K-Akt 通路而抑製富集人肝癌榦細胞的細胞毬的增殖。
목적：탐토 LY294002대부집간암간세포적세포구증식화린지선기순3-격매-단백격매 B （PI3K-Akt）통로적영향。방법대인간암 HepG2세포진행무혈청현부배양획득부집간암간세포적세포구，소화후사용 LY294002（10、20、30μmol/ L）배양작위실험조，대조조불사용 LY294002。세포활성계수법검측세포증식활성，Western blotting 검측 Akt，실시정량 PCR 검측 PI3K-Akt 신호통로하유기인유편수체3（DcR3）、포유동물뢰파매소파단백（mTOR）、B 림파세포류-2（Bcl-2）、세포주기단백 D1（Cyclin D1）적표체。결과여대조조상비，30μmol/ L LY294002가현저억제부집간암간세포적세포구증식，흡광도（A）치유현저차이[（0.14±0.03）：（0.56±0.01），t =-8.915，P =0.000]；린산화 Akt 표체수평명현강저[（0.57±0.08）：（0.16±0.42），t =6.027，P =0.026]；DcR3[（0.38±0.08）：1，t =13.060， P =0.006]、mTOR[（0.37±0.04）：1，t =30.363，P =0.001]、Bcl-2[（0.26±0.04）：1，t =33.554，P =0.001]、Cyclin D1[（0.1±0.02）：1，t =63.528，P =0.000]표체명현감소。결론 LY294002가능통과억제 PI3K-Akt 통로이억제부집인간암간세포적세포구적증식。
Objective To investigate the impact of LY294002 on the proliferation of cancer stem cell-enriched spheroid cells from human hepatocellular carcinoma via regulating phosphatidylinositol-3-kinaseprotein kinase B(PI3K-Akt)signaling pathway. Methods The cancer stem cell-enriched spheroid cells were genera-ted by culturing HepG2 cells in serum-free medium. LY294002(10,20,30 μmol/ L),an inhibitor of PI3K-Akt signaling pathway,was used in the experimental groups,without used in the control group. The impact of LY294002 on the spheroid cells proliferation was confirmed by cell counting kit(CCK-8 kit). The expression of Akt was tested by Western blotting. The expression of PI3K-Akt signaling pathway downstream genes such as decoy receptor 3(DcR3),mammalian target of rapamycin(mTOR),B-cell lymphoma(Bcl)-2 and Cyclin D1 were tested by real-time PCR. Results 30 μmol/ L LY294002 could inhibit the proliferation of spheroid cells, and significant difference in the absorbance(A value)was observed between the experimental group and control group[(0. 14 ± 0. 03)vs(0. 56 ± 0. 01),t = - 8. 915,P = 0. 000]. The expression level of phosphorylated Akt protein increased[(0. 57 ± 0. 08)vs(0. 16 ± 0. 42),t = 6. 027,P = 0. 026]. The mRNA of DcR3 [(0. 38 ± 0. 08)vs 1,t = 13. 060,P = 0. 006],mTOR[(0. 37 ± 0. 04)vs 1,t = 30. 363,P = 0. 001],Bcl-2 [(0. 26 ± 0. 04)vs 1,t = 33. 554,P = 0. 001]and Cyclin D1[(0. 10 ± 0. 02)vs 1,t = 63. 528,P = 0. 000] decreased. Conclusion LY294002 could inhibit the proliferation of cancer stem cell-enriched spheroid cells from human hepatocellular carcinoma via inhibiting PI3K-Akt signaling pathway.
