CAJ | 학술논문

为研究经典和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)疫苗株间的生物学差异,本实验以经典PRRSV疫苗株CH-1R的全长感染性克隆pCH-1R为骨架,利用反向遗传操作技术分别将其ORF1a、ORF1b和ORF2-7替换为HP-PRRSV HuN4-F112的相应片段,构建3个全长cDNA嵌合质粒.将构建的3个重组cDNA质粒经体外转录后转染BHK-21细胞,并于Marc-145细胞中传代,拯救出3种嵌合病毒,分别命名为rCH-1R-T1a、rCH-1R-T1b和rCH-1R-T27.病毒一步生长曲线结果表明,3种嵌合病毒在Marc-145细胞中的生长特性与亲本病毒CH-1R基本一致;动物实验结果显示,嵌合病毒实验组血清中PRRSVN蛋白抗体阳转率分别为3/3 (rCH-1 R-T1a)、2/3 (rCH-1R-T1b)和1/3 (rCH-1 R-T27),而CH-1R免疫组血清N蛋白抗体检测始终为阴性.以上结果表明,HP-PRRSV HuN4-F112非结构蛋白在N蛋白抗体产生中起关键辅助或协同作用.
위연구경전화고치병성저번식여호흡종합정병독(HP-PRRSV)역묘주간적생물학차이,본실험이경전PRRSV역묘주CH-1R적전장감염성극륭pCH-1R위골가,이용반향유전조작기술분별장기ORF1a、ORF1b화ORF2-7체환위HP-PRRSV HuN4-F112적상응편단,구건3개전장cDNA감합질립.장구건적3개중조cDNA질립경체외전록후전염BHK-21세포,병우Marc-145세포중전대,증구출3충감합병독,분별명명위rCH-1R-T1a、rCH-1R-T1b화rCH-1R-T27.병독일보생장곡선결과표명,3충감합병독재Marc-145세포중적생장특성여친본병독CH-1R기본일치;동물실험결과현시,감합병독실험조혈청중PRRSVN단백항체양전솔분별위3/3 (rCH-1 R-T1a)、2/3 (rCH-1R-T1b)화1/3 (rCH-1 R-T27),이CH-1R면역조혈청N단백항체검측시종위음성.이상결과표명,HP-PRRSV HuN4-F112비결구단백재N단백항체산생중기관건보조혹협동작용.