中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2015年
4期
279-281,290
,共4页
顾凡%覃娟娟%蔡雨函%李新琼%黄剑波%朱玲%刘书亮%徐志文
顧凡%覃娟娟%蔡雨函%李新瓊%黃劍波%硃玲%劉書亮%徐誌文
고범%담연연%채우함%리신경%황검파%주령%류서량%서지문
猪嵴病毒%猪星状病毒%双重RT-PCR
豬嵴病毒%豬星狀病毒%雙重RT-PCR
저척병독%저성상병독%쌍중RT-PCR
porcine Kobuvirus%porcine astrovirus%duplex RT-PCR
为建立同时检测猪嵴病毒(PKV)和猪星状病毒(AstV)的检测方法,本研究根据PKV 3D基因和AstVORF2基因设计了两对特异性引物,通过优化反应条件,首次建立了PKV和AstV双重RT-PCR检测方法.该方法可以同时扩增出PKV的358 bp和AstV的938 bp特异性片段,而对猪伪狂犬病病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒及大肠杆菌等病原核酸扩增结果均为阴性,具有较强的特异性;对PKV和AstV的最低检出量分别为1.51×106拷贝/μL和1.19×106拷贝/μL;利用该方法和单项RT-PCR方法对35份来自四川省部分猪场的仔猪腹泻病料样品进行检测.结果显示,PKV和AstV的阳性检出率分别为80％和31.4％,两者符合率为100％.本研究建立的方法对PKV和AstV的鉴别诊断和混合感染检测具有重要的应用价值.
為建立同時檢測豬嵴病毒(PKV)和豬星狀病毒(AstV)的檢測方法,本研究根據PKV 3D基因和AstVORF2基因設計瞭兩對特異性引物,通過優化反應條件,首次建立瞭PKV和AstV雙重RT-PCR檢測方法.該方法可以同時擴增齣PKV的358 bp和AstV的938 bp特異性片段,而對豬偽狂犬病病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒及大腸桿菌等病原覈痠擴增結果均為陰性,具有較彊的特異性;對PKV和AstV的最低檢齣量分彆為1.51×106拷貝/μL和1.19×106拷貝/μL;利用該方法和單項RT-PCR方法對35份來自四川省部分豬場的仔豬腹瀉病料樣品進行檢測.結果顯示,PKV和AstV的暘性檢齣率分彆為80％和31.4％,兩者符閤率為100％.本研究建立的方法對PKV和AstV的鑒彆診斷和混閤感染檢測具有重要的應用價值.
위건립동시검측저척병독(PKV)화저성상병독(AstV)적검측방법,본연구근거PKV 3D기인화AstVORF2기인설계료량대특이성인물,통과우화반응조건,수차건립료PKV화AstV쌍중RT-PCR검측방법.해방법가이동시확증출PKV적358 bp화AstV적938 bp특이성편단,이대저위광견병병독、저류행성복사병독、저전염성위장염병독급대장간균등병원핵산확증결과균위음성,구유교강적특이성;대PKV화AstV적최저검출량분별위1.51×106고패/μL화1.19×106고패/μL;이용해방법화단항RT-PCR방법대35빈래자사천성부분저장적자저복사병료양품진행검측.결과현시,PKV화AstV적양성검출솔분별위80％화31.4％,량자부합솔위100％.본연구건립적방법대PKV화AstV적감별진단화혼합감염검측구유중요적응용개치.
