A组猪轮状病毒NSP3蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定
A조저륜상병독NSP3단백단극륭항체적제비급항원표위감정
Preparation of monoclonal antibody against NSP3 protein of group A porcine rotavirus and identification of antigenic epitopes
  • 万方数据
    中国预防兽医学报 중국예방수의학보
    CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
    2015年 4期 295-298 ,共4页

    谷凤丽%石达%时洪艳%陈建飞%张鑫%袁婧%徐天%董慧%冯力

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    A组猪轮状病毒%NSP3蛋白%单克隆抗体%抗原表位 A組豬輪狀病毒%NSP3蛋白%單剋隆抗體%抗原錶位
    A조저륜상병독%NSP3단백%단극륭항체%항원표위
    porcine group A rotavirus%NSP3 pretein%monoclonal antibody%antigenic epitope
    为制备A组猪轮状病毒(PoRV)非结构蛋白NSP3的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究将原核表达、纯化的重组NSP3蛋白(rNSP3)免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞进行融合,经间接ELISA法筛选,得到一株能够稳定分泌抗PoRV (G9)的杂交瘤细胞株(5B8).MAb鉴定结果显示其抗体亚类为IgG1型;MAb细胞培养上清液效价为1:103,western blot及间接免疫荧光结果表明该株MAb能够与PoRV反应.对NSP3蛋白进行截短表达,采用western blot试验确定所获得的MAb识别的抗原表位区域序列为290QDYDRTFL297.该MAb的制备为进一步研究NSP3蛋白的结构和功能奠定了良好的基础.
    위제비A조저륜상병독(PoRV)비결구단백NSP3적단극륭항체(MAb)급감정기항원표위,본연구장원핵표체、순화적중조NSP3단백(rNSP3)면역BALB/c소서,취면역소서적비세포여SP2/0세포진행융합,경간접ELISA법사선,득도일주능구은정분비항PoRV (G9)적잡교류세포주(5B8).MAb감정결과현시기항체아류위IgG1형;MAb세포배양상청액효개위1:103,western blot급간접면역형광결과표명해주MAb능구여PoRV반응.대NSP3단백진행절단표체,채용western blot시험학정소획득적MAb식별적항원표위구역서렬위290QDYDRTFL297.해MAb적제비위진일보연구NSP3단백적결구화공능전정료량호적기출.
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