中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2015年
4期
315-317
,共3页
苏朝%尹鑫%马建%王晓钧
囌朝%尹鑫%馬建%王曉鈞
소조%윤흠%마건%왕효균
马传染性贫血病毒%Rev蛋白%酵母双杂交cDNA文库%马巨噬细胞
馬傳染性貧血病毒%Rev蛋白%酵母雙雜交cDNA文庫%馬巨噬細胞
마전염성빈혈병독%Rev단백%효모쌍잡교cDNA문고%마거서세포
equine infectious anemiavirus%Rev protein%yeast two hybrid cDNA library%equine macrophage
为研究马传染性贫血病毒(EIAV)蛋白与马巨噬细胞蛋白之间的相互作用,本研究利用SMART技术构建了马巨噬细胞的酵母双杂交cDNA文库,并利用该文库调取与EIAV Rev蛋白相互作用的细胞蛋白,构建诱饵质粒pGBKT7-rev,通过表型检测Rev的自激活和细胞毒性作用,并与构建的文库进行杂交筛选.对获得阳性克隆进行序列测定和比对分析,根据分析结果进行共转化验证.结果显示,文库的容量为3×108 cfu/mL.Rev蛋白在酵母双杂交系统中无自激活现象和细胞毒性作用.此外,本实验共筛选得到5个与EIAV Rev相互作用的宿主细胞蛋白.本研究为进一步研究Rev蛋白的生物学新功能奠定了基础.
為研究馬傳染性貧血病毒(EIAV)蛋白與馬巨噬細胞蛋白之間的相互作用,本研究利用SMART技術構建瞭馬巨噬細胞的酵母雙雜交cDNA文庫,併利用該文庫調取與EIAV Rev蛋白相互作用的細胞蛋白,構建誘餌質粒pGBKT7-rev,通過錶型檢測Rev的自激活和細胞毒性作用,併與構建的文庫進行雜交篩選.對穫得暘性剋隆進行序列測定和比對分析,根據分析結果進行共轉化驗證.結果顯示,文庫的容量為3×108 cfu/mL.Rev蛋白在酵母雙雜交繫統中無自激活現象和細胞毒性作用.此外,本實驗共篩選得到5箇與EIAV Rev相互作用的宿主細胞蛋白.本研究為進一步研究Rev蛋白的生物學新功能奠定瞭基礎.
위연구마전염성빈혈병독(EIAV)단백여마거서세포단백지간적상호작용,본연구이용SMART기술구건료마거서세포적효모쌍잡교cDNA문고,병이용해문고조취여EIAV Rev단백상호작용적세포단백,구건유이질립pGBKT7-rev,통과표형검측Rev적자격활화세포독성작용,병여구건적문고진행잡교사선.대획득양성극륭진행서렬측정화비대분석,근거분석결과진행공전화험증.결과현시,문고적용량위3×108 cfu/mL.Rev단백재효모쌍잡교계통중무자격활현상화세포독성작용.차외,본실험공사선득도5개여EIAV Rev상호작용적숙주세포단백.본연구위진일보연구Rev단백적생물학신공능전정료기출.
