中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2015年
4期
299-303
,共5页
金黄色葡萄球菌%大鼠IgG Fc基因%FnBPB-ClfA串联基因
金黃色葡萄毬菌%大鼠IgG Fc基因%FnBPB-ClfA串聯基因
금황색포도구균%대서IgG Fc기인%FnBPB-ClfA천련기인
Staphylococcus aureus%rat IgG Fc gene%FnBPB-ClfA gene
为提高金黄色葡萄球菌(S.aureus)串联表达的黏附素重组蛋白(rFnBPB-ClfA)的免疫效力,本研究将RT-PCR扩增的大鼠IgG Fc段基因与本实验室已构建的S.aureus FnBPB-ClfA基因串联,采用SOE-PCR进行扩增,制备Fc-FnBPB-ClfA融合基因,并将其克隆于pET-32a(+)载体中进行原核表达.将表达的重组蛋白(rFc-FnBPB-ClfA)经乳头管注射(200 μg/只)免疫哺乳期Wistar大鼠,并于加强免疫2周后,以1×109 cfuS.aureus经乳头管攻毒.结果表明,在加强免疫7d后,与rFnBPB-ClfA免疫组相比,rFc-FnBPB-ClfA免疫组血清和乳清中的抗体水平明显增高,而且IgG水平动态检测结果表明,其特异性抗体上升趋势明显高于rFnBPB-ClfA免疫组.攻毒保护试验证明,rFc-FnBPB-ClfA和rFnBPB-ClfA免疫组对S.aureus清除率均显著高于对照组(p＜0.01).本研究结果表明,rFc-FnBPB-ClfA对S.aureus乳房炎的免疫效果更佳,为进一步研制有效防治S.aureus乳房炎疫苗提供了实验依据.
為提高金黃色葡萄毬菌(S.aureus)串聯錶達的黏附素重組蛋白(rFnBPB-ClfA)的免疫效力,本研究將RT-PCR擴增的大鼠IgG Fc段基因與本實驗室已構建的S.aureus FnBPB-ClfA基因串聯,採用SOE-PCR進行擴增,製備Fc-FnBPB-ClfA融閤基因,併將其剋隆于pET-32a(+)載體中進行原覈錶達.將錶達的重組蛋白(rFc-FnBPB-ClfA)經乳頭管註射(200 μg/隻)免疫哺乳期Wistar大鼠,併于加彊免疫2週後,以1×109 cfuS.aureus經乳頭管攻毒.結果錶明,在加彊免疫7d後,與rFnBPB-ClfA免疫組相比,rFc-FnBPB-ClfA免疫組血清和乳清中的抗體水平明顯增高,而且IgG水平動態檢測結果錶明,其特異性抗體上升趨勢明顯高于rFnBPB-ClfA免疫組.攻毒保護試驗證明,rFc-FnBPB-ClfA和rFnBPB-ClfA免疫組對S.aureus清除率均顯著高于對照組(p＜0.01).本研究結果錶明,rFc-FnBPB-ClfA對S.aureus乳房炎的免疫效果更佳,為進一步研製有效防治S.aureus乳房炎疫苗提供瞭實驗依據.
위제고금황색포도구균(S.aureus)천련표체적점부소중조단백(rFnBPB-ClfA)적면역효력,본연구장RT-PCR확증적대서IgG Fc단기인여본실험실이구건적S.aureus FnBPB-ClfA기인천련,채용SOE-PCR진행확증,제비Fc-FnBPB-ClfA융합기인,병장기극륭우pET-32a(+)재체중진행원핵표체.장표체적중조단백(rFc-FnBPB-ClfA)경유두관주사(200 μg/지)면역포유기Wistar대서,병우가강면역2주후,이1×109 cfuS.aureus경유두관공독.결과표명,재가강면역7d후,여rFnBPB-ClfA면역조상비,rFc-FnBPB-ClfA면역조혈청화유청중적항체수평명현증고,이차IgG수평동태검측결과표명,기특이성항체상승추세명현고우rFnBPB-ClfA면역조.공독보호시험증명,rFc-FnBPB-ClfA화rFnBPB-ClfA면역조대S.aureus청제솔균현저고우대조조(p＜0.01).본연구결과표명,rFc-FnBPB-ClfA대S.aureus유방염적면역효과경가,위진일보연제유효방치S.aureus유방염역묘제공료실험의거.
