中国抗生素杂志
中國抗生素雜誌
중국항생소잡지
CHINESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS
2015年
4期
278-284
,共7页
傅雅琨%余加林%芦起%艾青%宋思捷%贺雨%张云辉
傅雅琨%餘加林%蘆起%艾青%宋思捷%賀雨%張雲輝
부아곤%여가림%호기%애청%송사첩%하우%장운휘
铜绿假单胞菌%轻型链球菌%生物膜%模型
銅綠假單胞菌%輕型鏈毬菌%生物膜%模型
동록가단포균%경형련구균%생물막%모형
Pesudomonas aeruginosa%Streptococcus mitis%Biofilm%Model
目的 探索混合细菌生物膜(biofilm,BF)培养的适宜条件,建立混合细菌BF体外模型,并为研究混合细菌BF的调控机制奠定基础.方法 分别培养铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)菌株PAO1、轻型链球菌(Streptococcus mitis)标准株ATCC49456.紫外分光光度计、CCK-8(cell counting kit-8)比色法比较2种细菌在不同pH值、培养基、混合比例、加入顺序和混合时间条件下的生长情况.建立单独及混合细菌BF后,荧光探针SYTO9/PI标记,激光共聚焦显微镜(confocal laserscanningmicroscopy,CLSM)观察BF内部活死菌比例.扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)观察BF结构.结果 pH值为7.5最适宜2种细菌生长,P＜0.01:2种细菌在脑心浸出液培养基中生长明显优于胰大豆蛋白胨肉汤培养基,P＜0.01;PAO1与Smitis以1:3混合,且PAO1优先加入,能形成较好的BF,P＜0.01;2种细菌混合的时机以PAO1培养后立即混合Smitis为优,P＜0.01.CLSM结果显示PAO1可形成成熟致密的BF;S.mitis单独培养不形成BF;混合细菌BF较单独PAO1组活菌比例增多,3组厚度分别为(19.02±1.298)μm,(2.250±0.25)μm和(28.76±3.472)μm,P＜0.05.SEM显示混合细菌BF内两种细菌共存,结构更加致密立体.结论 成功建立PAO1混合Smitis的BF体外模型,方法简便易行,结果可靠,重复性强.初步证实S.mitis可参与混合菌BF形成,并起促进作用.
目的 探索混閤細菌生物膜(biofilm,BF)培養的適宜條件,建立混閤細菌BF體外模型,併為研究混閤細菌BF的調控機製奠定基礎.方法 分彆培養銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)菌株PAO1、輕型鏈毬菌(Streptococcus mitis)標準株ATCC49456.紫外分光光度計、CCK-8(cell counting kit-8)比色法比較2種細菌在不同pH值、培養基、混閤比例、加入順序和混閤時間條件下的生長情況.建立單獨及混閤細菌BF後,熒光探針SYTO9/PI標記,激光共聚焦顯微鏡(confocal laserscanningmicroscopy,CLSM)觀察BF內部活死菌比例.掃描電鏡(scanning electron microscopy,SEM)觀察BF結構.結果 pH值為7.5最適宜2種細菌生長,P＜0.01:2種細菌在腦心浸齣液培養基中生長明顯優于胰大豆蛋白胨肉湯培養基,P＜0.01;PAO1與Smitis以1:3混閤,且PAO1優先加入,能形成較好的BF,P＜0.01;2種細菌混閤的時機以PAO1培養後立即混閤Smitis為優,P＜0.01.CLSM結果顯示PAO1可形成成熟緻密的BF;S.mitis單獨培養不形成BF;混閤細菌BF較單獨PAO1組活菌比例增多,3組厚度分彆為(19.02±1.298)μm,(2.250±0.25)μm和(28.76±3.472)μm,P＜0.05.SEM顯示混閤細菌BF內兩種細菌共存,結構更加緻密立體.結論 成功建立PAO1混閤Smitis的BF體外模型,方法簡便易行,結果可靠,重複性彊.初步證實S.mitis可參與混閤菌BF形成,併起促進作用.
목적 탐색혼합세균생물막(biofilm,BF)배양적괄의조건,건립혼합세균BF체외모형,병위연구혼합세균BF적조공궤제전정기출.방법 분별배양동록가단포균(Pseudomonas aeruginosa)균주PAO1、경형련구균(Streptococcus mitis)표준주ATCC49456.자외분광광도계、CCK-8(cell counting kit-8)비색법비교2충세균재불동pH치、배양기、혼합비례、가입순서화혼합시간조건하적생장정황.건립단독급혼합세균BF후,형광탐침SYTO9/PI표기,격광공취초현미경(confocal laserscanningmicroscopy,CLSM)관찰BF내부활사균비례.소묘전경(scanning electron microscopy,SEM)관찰BF결구.결과 pH치위7.5최괄의2충세균생장,P＜0.01:2충세균재뇌심침출액배양기중생장명현우우이대두단백동육탕배양기,P＜0.01;PAO1여Smitis이1:3혼합,차PAO1우선가입,능형성교호적BF,P＜0.01;2충세균혼합적시궤이PAO1배양후립즉혼합Smitis위우,P＜0.01.CLSM결과현시PAO1가형성성숙치밀적BF;S.mitis단독배양불형성BF;혼합세균BF교단독PAO1조활균비례증다,3조후도분별위(19.02±1.298)μm,(2.250±0.25)μm화(28.76±3.472)μm,P＜0.05.SEM현시혼합세균BF내량충세균공존,결구경가치밀입체.결론 성공건립PAO1혼합Smitis적BF체외모형,방법간편역행,결과가고,중복성강.초보증실S.mitis가삼여혼합균BF형성,병기촉진작용.
