广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2015年
5期
103-108
,共6页
陈丹%游子娟%黄伟谦%马纳纳%罗晓春
陳丹%遊子娟%黃偉謙%馬納納%囉曉春
진단%유자연%황위겸%마납납%라효춘
米曲霉%重组羧肽酶O%酶学性质%脱苦
米麯黴%重組羧肽酶O%酶學性質%脫苦
미곡매%중조최태매O%매학성질%탈고
为了研究羧肽酶在蛋白水解及对蛋白水解物脱苦中的重要作用,利用毕赤酵母表达系统对米曲霉(Asperigillus oryzae)羧肽酶O(carboxypeptidase O,OcpO)进行表达.重组米曲霉羧肽酶O(rOcpO)经过分子筛和离子柱纯化,对其进行脱糖基化及酶学性质的检测研究.结果表明,该蛋白酶是以糖蛋白的形式进行表达,分子量约为74 ku,脱糖基化后的相对分子质量约为56 ku,产量约为20.4 nKat/mL.该蛋白酶是一种酸性蛋白酶,最适pH值为4.0,且在pH 3.0～6.0时保持稳定;最适温度约为40℃,具有良好的热稳定性,在60℃孵育1h后仍能保持63％的酶活;PMSF能够显著抑制该酶酶活,证明其为丝氨酸羧肽酶.通过rOcpO对大豆蛋白和酪蛋白的Alcalase蛋白酶水解物的进一步水解研究发现,rOcpO水解对两种水解液的苦味均有明显减轻,并且水解度有明显升高.
為瞭研究羧肽酶在蛋白水解及對蛋白水解物脫苦中的重要作用,利用畢赤酵母錶達繫統對米麯黴(Asperigillus oryzae)羧肽酶O(carboxypeptidase O,OcpO)進行錶達.重組米麯黴羧肽酶O(rOcpO)經過分子篩和離子柱純化,對其進行脫糖基化及酶學性質的檢測研究.結果錶明,該蛋白酶是以糖蛋白的形式進行錶達,分子量約為74 ku,脫糖基化後的相對分子質量約為56 ku,產量約為20.4 nKat/mL.該蛋白酶是一種痠性蛋白酶,最適pH值為4.0,且在pH 3.0～6.0時保持穩定;最適溫度約為40℃,具有良好的熱穩定性,在60℃孵育1h後仍能保持63％的酶活;PMSF能夠顯著抑製該酶酶活,證明其為絲氨痠羧肽酶.通過rOcpO對大豆蛋白和酪蛋白的Alcalase蛋白酶水解物的進一步水解研究髮現,rOcpO水解對兩種水解液的苦味均有明顯減輕,併且水解度有明顯升高.
위료연구최태매재단백수해급대단백수해물탈고중적중요작용,이용필적효모표체계통대미곡매(Asperigillus oryzae)최태매O(carboxypeptidase O,OcpO)진행표체.중조미곡매최태매O(rOcpO)경과분자사화리자주순화,대기진행탈당기화급매학성질적검측연구.결과표명,해단백매시이당단백적형식진행표체,분자량약위74 ku,탈당기화후적상대분자질량약위56 ku,산량약위20.4 nKat/mL.해단백매시일충산성단백매,최괄pH치위4.0,차재pH 3.0～6.0시보지은정;최괄온도약위40℃,구유량호적열은정성,재60℃부육1h후잉능보지63％적매활;PMSF능구현저억제해매매활,증명기위사안산최태매.통과rOcpO대대두단백화락단백적Alcalase단백매수해물적진일보수해연구발현,rOcpO수해대량충수해액적고미균유명현감경,병차수해도유명현승고.
