中国组织化学与细胞化学杂志
中國組織化學與細胞化學雜誌
중국조직화학여세포화학잡지
CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISY AND CYTOCHEMISY
2015年
1期
34-39
,共6页
王艺东%杨碧莹%潘经锐%纪原%彭晴霞
王藝東%楊碧瑩%潘經銳%紀原%彭晴霞
왕예동%양벽형%반경예%기원%팽청하
Toll样受体9%小胶质细胞%氧葡萄糖剥夺%炎症
Toll樣受體9%小膠質細胞%氧葡萄糖剝奪%炎癥
Toll양수체9%소효질세포%양포도당박탈%염증
Toll-like receptor 9%Microglia%Oxygen-glucose deprivation%Toll-like receptor 9%InflammationInflammation
目的 观察氧葡萄糖剥夺-再恢复(OGDR)后小胶质细胞(BV-2细胞)Toll样受体9(TLR9)及其下游信号分子的表达变化.方法 对BV-2细胞进行OGDR处理,模拟脑缺血再灌注的体内过程.以常氧培养的BV-2细胞作为对照.细胞免疫化学方法检测BV-2细胞的激活.在OGDR后0h、6h、12h、24 h、48 h、72 h,荧光定量PCR检测细胞内TLR9 mRNA表达,Western Blot检测细胞内NF-κB(P65)、磷酸化NF-κB(P-P65)、IRF7、磷酸化IRF7(P-IRF7)蛋白表达,ELISA检测细胞上清TNF-α、IL-1β和IFN-β的含量.结果 OGDR后BV-2细胞由原来静止的分枝状变成激活的阿米巴状,CD68染色阳性.除0h外,其余时间点OGDR组TLR9 mRNA的相对表达量与对照组相应时间点比较均有上调,表达高峰位于24 h.OGDR后各时间点P65和IRF7表达无明显变化.P-P65 0 h、6h、12h明显增高,24 h、48 h、72 h表达无明显增高.P-IRF7在0h、6h无明显增高,12 h-72 h明显升高.OGDR后TNF-α和IL-1β表达增多,TNF-α表达高峰于24-48 h,IL-1β表达高峰位于48h.IFN-β表达无明显变化.结论 OGDR后小胶质细胞TLR9信号通路的活化以促炎途径为主.
目的 觀察氧葡萄糖剝奪-再恢複(OGDR)後小膠質細胞(BV-2細胞)Toll樣受體9(TLR9)及其下遊信號分子的錶達變化.方法 對BV-2細胞進行OGDR處理,模擬腦缺血再灌註的體內過程.以常氧培養的BV-2細胞作為對照.細胞免疫化學方法檢測BV-2細胞的激活.在OGDR後0h、6h、12h、24 h、48 h、72 h,熒光定量PCR檢測細胞內TLR9 mRNA錶達,Western Blot檢測細胞內NF-κB(P65)、燐痠化NF-κB(P-P65)、IRF7、燐痠化IRF7(P-IRF7)蛋白錶達,ELISA檢測細胞上清TNF-α、IL-1β和IFN-β的含量.結果 OGDR後BV-2細胞由原來靜止的分枝狀變成激活的阿米巴狀,CD68染色暘性.除0h外,其餘時間點OGDR組TLR9 mRNA的相對錶達量與對照組相應時間點比較均有上調,錶達高峰位于24 h.OGDR後各時間點P65和IRF7錶達無明顯變化.P-P65 0 h、6h、12h明顯增高,24 h、48 h、72 h錶達無明顯增高.P-IRF7在0h、6h無明顯增高,12 h-72 h明顯升高.OGDR後TNF-α和IL-1β錶達增多,TNF-α錶達高峰于24-48 h,IL-1β錶達高峰位于48h.IFN-β錶達無明顯變化.結論 OGDR後小膠質細胞TLR9信號通路的活化以促炎途徑為主.
목적 관찰양포도당박탈-재회복(OGDR)후소효질세포(BV-2세포)Toll양수체9(TLR9)급기하유신호분자적표체변화.방법 대BV-2세포진행OGDR처리,모의뇌결혈재관주적체내과정.이상양배양적BV-2세포작위대조.세포면역화학방법검측BV-2세포적격활.재OGDR후0h、6h、12h、24 h、48 h、72 h,형광정량PCR검측세포내TLR9 mRNA표체,Western Blot검측세포내NF-κB(P65)、린산화NF-κB(P-P65)、IRF7、린산화IRF7(P-IRF7)단백표체,ELISA검측세포상청TNF-α、IL-1β화IFN-β적함량.결과 OGDR후BV-2세포유원래정지적분지상변성격활적아미파상,CD68염색양성.제0h외,기여시간점OGDR조TLR9 mRNA적상대표체량여대조조상응시간점비교균유상조,표체고봉위우24 h.OGDR후각시간점P65화IRF7표체무명현변화.P-P65 0 h、6h、12h명현증고,24 h、48 h、72 h표체무명현증고.P-IRF7재0h、6h무명현증고,12 h-72 h명현승고.OGDR후TNF-α화IL-1β표체증다,TNF-α표체고봉우24-48 h,IL-1β표체고봉위우48h.IFN-β표체무명현변화.결론 OGDR후소효질세포TLR9신호통로적활화이촉염도경위주.
