安徽科技学院学报
安徽科技學院學報
안휘과기학원학보
JOURNAL OF ANHUI SCIENCE AND TECHNOLOGY UNIVERSITY
2014年
6期
5-9
,共5页
赵磊%王旋%龚争%吴章青%张训海
趙磊%王鏇%龔爭%吳章青%張訓海
조뢰%왕선%공쟁%오장청%장훈해
小鹅瘟%PCR%快速诊断
小鵝瘟%PCR%快速診斷
소아온%PCR%쾌속진단
为建立快速诊断小鹅瘟的PCR方法,根据已发表的GPV主要结构蛋白VP3基因序列,经多序列比对和Oligo 6.0软件分析设计特异性PCR引物.以微量法提取病鹅肝组织DNA,优化PCR反应引物退火温度、循环次数和鉴定其特异性,并与酚氯仿法和煮沸法进行同步对比研究.结果显示,建立的PCR检测方法能够特异性检测病鹅肝组织中GPV的核酸,其扩增片段大小为343bp,最佳退火温度为58℃,最佳循环次数为35次.微量法提取的病毒核酸PCR检测灵敏度分别是酚氯仿法的50倍和煮沸法的2500倍.该PCR检测方法不与鹅副黏病毒、禽流感病毒、传染性支气管炎病毒、鸭瘟病毒以及健康鹅肝组织发生交叉反应.本研究建立的GPV PCR检测方法能够快速诊断小鹅瘟.
為建立快速診斷小鵝瘟的PCR方法,根據已髮錶的GPV主要結構蛋白VP3基因序列,經多序列比對和Oligo 6.0軟件分析設計特異性PCR引物.以微量法提取病鵝肝組織DNA,優化PCR反應引物退火溫度、循環次數和鑒定其特異性,併與酚氯倣法和煮沸法進行同步對比研究.結果顯示,建立的PCR檢測方法能夠特異性檢測病鵝肝組織中GPV的覈痠,其擴增片段大小為343bp,最佳退火溫度為58℃,最佳循環次數為35次.微量法提取的病毒覈痠PCR檢測靈敏度分彆是酚氯倣法的50倍和煮沸法的2500倍.該PCR檢測方法不與鵝副黏病毒、禽流感病毒、傳染性支氣管炎病毒、鴨瘟病毒以及健康鵝肝組織髮生交扠反應.本研究建立的GPV PCR檢測方法能夠快速診斷小鵝瘟.
위건립쾌속진단소아온적PCR방법,근거이발표적GPV주요결구단백VP3기인서렬,경다서렬비대화Oligo 6.0연건분석설계특이성PCR인물.이미량법제취병아간조직DNA,우화PCR반응인물퇴화온도、순배차수화감정기특이성,병여분록방법화자비법진행동보대비연구.결과현시,건립적PCR검측방법능구특이성검측병아간조직중GPV적핵산,기확증편단대소위343bp,최가퇴화온도위58℃,최가순배차수위35차.미량법제취적병독핵산PCR검측령민도분별시분록방법적50배화자비법적2500배.해PCR검측방법불여아부점병독、금류감병독、전염성지기관염병독、압온병독이급건강아간조직발생교차반응.본연구건립적GPV PCR검측방법능구쾌속진단소아온.
