中华放射医学与防护杂志
中華放射醫學與防護雜誌
중화방사의학여방호잡지
Chinese Journal of Radiological Medicine and Protection
2015年
3期
161-164
,共4页
徐华林%孙阳%崔凤梅%涂彧
徐華林%孫暘%崔鳳梅%塗彧
서화림%손양%최봉매%도욱
硫酸镁%人脐静脉血管内皮细胞%X射线%CCK-8%γ-H2AX
硫痠鎂%人臍靜脈血管內皮細胞%X射線%CCK-8%γ-H2AX
류산미%인제정맥혈관내피세포%X사선%CCK-8%γ-H2AX
Magnesium sulfate%Human umbilical vein endothelial%X-rays%CCK-8%γ-H2AX
目的 探讨不同浓度硫酸镁对照射后人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial,HUVEC)存活率及γ-H2AX表达的影响.方法 CCK-8法检测不同浓度的硫酸镁对HUVEC存活率的影响;激光共聚焦显微镜检测4GyX射线照射后不同时间HUVEC中γ-H2AX簇集点(foci)的数量;流式细胞术和Western blot检测γ-H2AX蛋白的表达情况.结果 CCK-8法显示,1.25 mg/ml浓度的硫酸镁能提高照射后的细胞存活率(t=-6.34,P<0.05);细胞免疫荧光结果显示,照射后0.5~1 hfoci焦点数达到最高值,平均达45个,随着时间的延长loci点数变少,强度减弱,具有时间依赖性,而硫酸镁在照后0.5、1、2、6、12 h均可以明显减少loci的形成(t=12.62、6.36、11.93、5.75、9.43,P<0.05);流式细胞仪检测表明,硫酸镁在照后0.5、1、2h可以抑制X射线照射后γ-H2AX蛋白表达量的增加(t=6.07、5.32、11.85,P<0.05);Western blot结果与细胞免疫荧光结果一致.结论 硫酸镁可以增加照射后HUVEC的存活率,降低X射线诱导的DNA损伤蛋白γ-H2AX的表达.
目的 探討不同濃度硫痠鎂對照射後人臍靜脈血管內皮細胞(human umbilical vein endothelial,HUVEC)存活率及γ-H2AX錶達的影響.方法 CCK-8法檢測不同濃度的硫痠鎂對HUVEC存活率的影響;激光共聚焦顯微鏡檢測4GyX射線照射後不同時間HUVEC中γ-H2AX簇集點(foci)的數量;流式細胞術和Western blot檢測γ-H2AX蛋白的錶達情況.結果 CCK-8法顯示,1.25 mg/ml濃度的硫痠鎂能提高照射後的細胞存活率(t=-6.34,P<0.05);細胞免疫熒光結果顯示,照射後0.5~1 hfoci焦點數達到最高值,平均達45箇,隨著時間的延長loci點數變少,彊度減弱,具有時間依賴性,而硫痠鎂在照後0.5、1、2、6、12 h均可以明顯減少loci的形成(t=12.62、6.36、11.93、5.75、9.43,P<0.05);流式細胞儀檢測錶明,硫痠鎂在照後0.5、1、2h可以抑製X射線照射後γ-H2AX蛋白錶達量的增加(t=6.07、5.32、11.85,P<0.05);Western blot結果與細胞免疫熒光結果一緻.結論 硫痠鎂可以增加照射後HUVEC的存活率,降低X射線誘導的DNA損傷蛋白γ-H2AX的錶達.
목적 탐토불동농도류산미대조사후인제정맥혈관내피세포(human umbilical vein endothelial,HUVEC)존활솔급γ-H2AX표체적영향.방법 CCK-8법검측불동농도적류산미대HUVEC존활솔적영향;격광공취초현미경검측4GyX사선조사후불동시간HUVEC중γ-H2AX족집점(foci)적수량;류식세포술화Western blot검측γ-H2AX단백적표체정황.결과 CCK-8법현시,1.25 mg/ml농도적류산미능제고조사후적세포존활솔(t=-6.34,P<0.05);세포면역형광결과현시,조사후0.5~1 hfoci초점수체도최고치,평균체45개,수착시간적연장loci점수변소,강도감약,구유시간의뢰성,이류산미재조후0.5、1、2、6、12 h균가이명현감소loci적형성(t=12.62、6.36、11.93、5.75、9.43,P<0.05);류식세포의검측표명,류산미재조후0.5、1、2h가이억제X사선조사후γ-H2AX단백표체량적증가(t=6.07、5.32、11.85,P<0.05);Western blot결과여세포면역형광결과일치.결론 류산미가이증가조사후HUVEC적존활솔,강저X사선유도적DNA손상단백γ-H2AX적표체.
Objective To investigate the influence of MgSO4 with different concentrations on cell survival and γ-H2AX expression in HUVEC irradiated with X-rays.Methods Cell proliferation rate was assayed by CCK-8,γ-H2AX foci formationwas observed with a laser confocal microscope,and γ-H2AX protein expression was detected by flow cytometer and Western blot assay.Results MgSO4 with a concentration of 1.25 mg/ml could improve the survival rate of IHUVEC treated with X-rays (t =-6.34,P < 0.05).After irradiation,γ-H2AX loci approached to the highest level from 30 min to 1 h after radiation and then decreased.MgSO4 significantly reduced the foci formation at 0.5,1,2,6 and 12 h postirradiation (t =12.62,6.36,11.93,5.75,9.43,P < 0.05).Both flow cytometry,and Western blot assays showed that MgSO4 inhibited γ-H2AX protein expression at 0.5,1 and 2 h post-irradiation (t =6.07,5.32,11.85,P < 0.05).Conclusions MgSO4 could improve the survival rate and reduced γ-H2AX expression in HUVEC irradiated with X-ray.