中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2015年
3期
233-237
,共5页
韩林林%阿力马斯别克·哈山%李金萍%唐杰%刘文鑫%关玮琨%李星月%赵志腾%师东方
韓林林%阿力馬斯彆剋·哈山%李金萍%唐傑%劉文鑫%關瑋琨%李星月%趙誌騰%師東方
한림림%아력마사별극·합산%리금평%당걸%류문흠%관위곤%리성월%조지등%사동방
大肠杆菌%耐热肠毒素%基因串联体%免疫原性%单克隆抗体
大腸桿菌%耐熱腸毒素%基因串聯體%免疫原性%單剋隆抗體
대장간균%내열장독소%기인천련체%면역원성%단극륭항체
Escherichia coli%heat-stable enterotoxin%gene concatemer%immunogenicity%monoclonal antibody
为制备具有免疫原性的重组大肠杆菌耐热肠毒素蛋白(STp)及抗STp特异性单克隆抗体(MAb),本研究将5拷贝estp串联,克隆于pGEX-6p-1中,构建重组表达质粒pGEX-estp5-his,并转化于大肠杆菌中进行重组蛋白STp5-His(rSTp5-His)的表达.以rSTp5-His为免疫原,重组蛋白MBP-5STp为检测抗原,制备和筛选阳性杂交瘤细胞株,并采用western blot、阻断ELISA方法对MAb进行鉴定.结果显示,rSTp5-His主要以包涵体形式表达,大小约为38 ku,具有良好的免疫原性,以其作为免疫原制备了4株能够识别天然STp的MAb,特异性良好.研究表明,多拷贝基因串联表达可以制备具有免疫原性的重组STp蛋白,所制备的MAb为天然STp和重组STp蛋白检测方法的建立奠定了基础.
為製備具有免疫原性的重組大腸桿菌耐熱腸毒素蛋白(STp)及抗STp特異性單剋隆抗體(MAb),本研究將5拷貝estp串聯,剋隆于pGEX-6p-1中,構建重組錶達質粒pGEX-estp5-his,併轉化于大腸桿菌中進行重組蛋白STp5-His(rSTp5-His)的錶達.以rSTp5-His為免疫原,重組蛋白MBP-5STp為檢測抗原,製備和篩選暘性雜交瘤細胞株,併採用western blot、阻斷ELISA方法對MAb進行鑒定.結果顯示,rSTp5-His主要以包涵體形式錶達,大小約為38 ku,具有良好的免疫原性,以其作為免疫原製備瞭4株能夠識彆天然STp的MAb,特異性良好.研究錶明,多拷貝基因串聯錶達可以製備具有免疫原性的重組STp蛋白,所製備的MAb為天然STp和重組STp蛋白檢測方法的建立奠定瞭基礎.
위제비구유면역원성적중조대장간균내열장독소단백(STp)급항STp특이성단극륭항체(MAb),본연구장5고패estp천련,극륭우pGEX-6p-1중,구건중조표체질립pGEX-estp5-his,병전화우대장간균중진행중조단백STp5-His(rSTp5-His)적표체.이rSTp5-His위면역원,중조단백MBP-5STp위검측항원,제비화사선양성잡교류세포주,병채용western blot、조단ELISA방법대MAb진행감정.결과현시,rSTp5-His주요이포함체형식표체,대소약위38 ku,구유량호적면역원성,이기작위면역원제비료4주능구식별천연STp적MAb,특이성량호.연구표명,다고패기인천련표체가이제비구유면역원성적중조STp단백,소제비적MAb위천연STp화중조STp단백검측방법적건립전정료기출.
