中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2015年
3期
220-224
,共5页
董慧%张鑫%陈建飞%时洪艳%石达%常铁城%谷凤丽%徐天%王智琴
董慧%張鑫%陳建飛%時洪豔%石達%常鐵城%穀鳳麗%徐天%王智琴
동혜%장흠%진건비%시홍염%석체%상철성%곡봉려%서천%왕지금
猪传染性胃肠炎病毒%nsp5基因%单克隆抗体%抗原表位
豬傳染性胃腸炎病毒%nsp5基因%單剋隆抗體%抗原錶位
저전염성위장염병독%nsp5기인%단극륭항체%항원표위
porcine transmissible gastroenteritis virus%nsp5 gene%monoclonal antibody%antigenic epitope
为制备猪传染性胃肠炎病-毒(TGEV)NSP5蛋白的单抗隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究以原核表达并纯化的重组NSP5蛋白(rNSP5-GST)免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/0细胞进行融合,通过间接EHSA方法筛出一株稳定分泌抗TGEV NSP5蛋白的MAb杂交瘤细胞株(5c3).MAb亚类鉴定结果显示其抗体亚类为IgG1/κ链.杂交瘤细胞培养上清液和腹水的效价分别为1:6 400和1:105.Western blot鉴定表明该MAb能够识别原核及真核表达的NSP5重组蛋白.利用肽扫描法鉴定显示,该MAb识别的抗原表位为286EFTPTEVIRQMYGVN300.本研究制备的MAb及其抗原表位的鉴定,为TGEV NSP5蛋白结构和功能的研究奠定了基础.
為製備豬傳染性胃腸炎病-毒(TGEV)NSP5蛋白的單抗隆抗體(MAb)及鑒定其抗原錶位,本研究以原覈錶達併純化的重組NSP5蛋白(rNSP5-GST)免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴細胞與SP2/0細胞進行融閤,通過間接EHSA方法篩齣一株穩定分泌抗TGEV NSP5蛋白的MAb雜交瘤細胞株(5c3).MAb亞類鑒定結果顯示其抗體亞類為IgG1/κ鏈.雜交瘤細胞培養上清液和腹水的效價分彆為1:6 400和1:105.Western blot鑒定錶明該MAb能夠識彆原覈及真覈錶達的NSP5重組蛋白.利用肽掃描法鑒定顯示,該MAb識彆的抗原錶位為286EFTPTEVIRQMYGVN300.本研究製備的MAb及其抗原錶位的鑒定,為TGEV NSP5蛋白結構和功能的研究奠定瞭基礎.
위제비저전염성위장염병-독(TGEV)NSP5단백적단항륭항체(MAb)급감정기항원표위,본연구이원핵표체병순화적중조NSP5단백(rNSP5-GST)면역BALB/c소서,취기비림파세포여SP2/0세포진행융합,통과간접EHSA방법사출일주은정분비항TGEV NSP5단백적MAb잡교류세포주(5c3).MAb아류감정결과현시기항체아류위IgG1/κ련.잡교류세포배양상청액화복수적효개분별위1:6 400화1:105.Western blot감정표명해MAb능구식별원핵급진핵표체적NSP5중조단백.이용태소묘법감정현시,해MAb식별적항원표위위286EFTPTEVIRQMYGVN300.본연구제비적MAb급기항원표위적감정,위TGEV NSP5단백결구화공능적연구전정료기출.
