CAJ | 학술논문

目的:本研究通过不同细胞因子的组合定向诱导脐血单个核细胞分化扩增杀伤性T细胞(CTL)并探讨其功能.方法:利用密度梯度离心法获得脐血单个核细胞(MNK),添加IL-2、IL-15、PHA-P和IFN-γ等多种因子,诱导分化并扩增CTL细胞;通过流式细胞术、细胞杀伤实验及定量PCR技术检测其生物学功能.结果:经过15 d的培养细胞数量明显增多,细胞增殖率平均为(1 522±137)％.流式细胞仪检测显示,直接分离的脐血单个核细胞流式分型的结果为95％以上属CD3-CD8-,体外培养15 d后CD3+ CD8+细胞的比例高达82.77±5.61,具有良好的杀瘤活性,直接提取的MNC细胞对HeLa细胞及K562细胞的杀伤效果平均值为(61.88±1.08)％,培养后的CTL细胞杀伤效果均能达到80％以上,平均值为(90.33±2.02)％,与对照组相比有显著提高;同时颗粒酶(Granzyme)A、颗粒酶B、GM-CSF、颗粒溶素(Granulysin)、IFN-γ、TGF-β、TNF-α和穿孔素(perfofin)等相关细胞因子的mRNA表达水平均有不同程度增加,与对照组相比IFN-γ和TGF-β的表达显著上调(P＜0.05),其余因子的表达极显著上调(P＜0.01).结论:脐血造血单个核细胞能体外分化为杀伤性T淋巴细胞,并可以大量扩增,脐血可以作为肿瘤过继免疫治疗所需T淋巴细胞的来源.
목적:본연구통과불동세포인자적조합정향유도제혈단개핵세포분화확증살상성T세포(CTL)병탐토기공능.방법:이용밀도제도리심법획득제혈단개핵세포(MNK),첨가IL-2、IL-15、PHA-P화IFN-γ등다충인자,유도분화병확증CTL세포;통과류식세포술、세포살상실험급정량PCR기술검측기생물학공능.결과:경과15 d적배양세포수량명현증다,세포증식솔평균위(1 522±137)％.류식세포의검측현시,직접분리적제혈단개핵세포류식분형적결과위95％이상속CD3-CD8-,체외배양15 d후CD3+ CD8+세포적비례고체82.77±5.61,구유량호적살류활성,직접제취적MNC세포대HeLa세포급K562세포적살상효과평균치위(61.88±1.08)％,배양후적CTL세포살상효과균능체도80％이상,평균치위(90.33±2.02)％,여대조조상비유현저제고;동시과립매(Granzyme)A、과립매B、GM-CSF、과립용소(Granulysin)、IFN-γ、TGF-β、TNF-α화천공소(perfofin)등상관세포인자적mRNA표체수평균유불동정도증가,여대조조상비IFN-γ화TGF-β적표체현저상조(P＜0.05),기여인자적표체겁현저상조(P＜0.01).결론:제혈조혈단개핵세포능체외분화위살상성T림파세포,병가이대량확증,제혈가이작위종류과계면역치료소수T림파세포적래원.