中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2015年
3期
194-198
,共5页
张晓文%姜帆%孙明君%郑小龙%于业峰%王群
張曉文%薑帆%孫明君%鄭小龍%于業峰%王群
장효문%강범%손명군%정소룡%우업봉%왕군
H3N8亚型马流感病毒%假病毒颗粒%Armored RNA技术
H3N8亞型馬流感病毒%假病毒顆粒%Armored RNA技術
H3N8아형마류감병독%가병독과립%Armored RNA기술
H3N8 equine influenza virus%virus-like particles%Armored RNA
为构建含H3N8马流感(EIV) HA基因的噬菌体病毒样颗粒(VLPs),本研究将编码组氨酸标签序列插入MS2噬菌体编码外壳蛋白的β发夹环结构序列中,构建含有重组组氨酸标签的MS2噬菌体外壳蛋白和表达成熟酶蛋白基因的重组质粒pNH-MS2his.并通过RT-RCR技术扩增H3N8亚型EIV的HA基因,将其克隆于pNH-MS2his中,构建原核重组表达质粒pNH-MS2his-H3,并将其转化于大肠杆菌BL21 (DE3)中进行诱导表达.结果表明,表达的重组蛋白能够自主装配形成VLPs,其中含有H3N8亚型EIV的HA基因RNA序列,并且该RNA序列具有良好的稳定性,可以作为RNA病毒检测时的标准品和质控品用于临床及海关样品检测.
為構建含H3N8馬流感(EIV) HA基因的噬菌體病毒樣顆粒(VLPs),本研究將編碼組氨痠標籤序列插入MS2噬菌體編碼外殼蛋白的β髮夾環結構序列中,構建含有重組組氨痠標籤的MS2噬菌體外殼蛋白和錶達成熟酶蛋白基因的重組質粒pNH-MS2his.併通過RT-RCR技術擴增H3N8亞型EIV的HA基因,將其剋隆于pNH-MS2his中,構建原覈重組錶達質粒pNH-MS2his-H3,併將其轉化于大腸桿菌BL21 (DE3)中進行誘導錶達.結果錶明,錶達的重組蛋白能夠自主裝配形成VLPs,其中含有H3N8亞型EIV的HA基因RNA序列,併且該RNA序列具有良好的穩定性,可以作為RNA病毒檢測時的標準品和質控品用于臨床及海關樣品檢測.
위구건함H3N8마류감(EIV) HA기인적서균체병독양과립(VLPs),본연구장편마조안산표첨서렬삽입MS2서균체편마외각단백적β발협배결구서렬중,구건함유중조조안산표첨적MS2서균체외각단백화표체성숙매단백기인적중조질립pNH-MS2his.병통과RT-RCR기술확증H3N8아형EIV적HA기인,장기극륭우pNH-MS2his중,구건원핵중조표체질립pNH-MS2his-H3,병장기전화우대장간균BL21 (DE3)중진행유도표체.결과표명,표체적중조단백능구자주장배형성VLPs,기중함유H3N8아형EIV적HA기인RNA서렬,병차해RNA서렬구유량호적은정성,가이작위RNA병독검측시적표준품화질공품용우림상급해관양품검측.
