CAJ | 학술논문

目的:探讨唯BH3域(BH3 only domain,BH3)模拟物3-硫吗啉基-8-氧-8H-苊并[1,2-b]吡咯-9-腈(S1)诱导急性髓系白血病(AML)原代细胞凋亡的分子标志物.方法:分离27例人初发AML的单个核细胞,使用流式细胞术检测细胞凋亡.通过四氮唑盐(XTT)法检测S1作用下AML细胞的半数抑制浓度(IC50).应用Westernblot测定AML细胞中BCL-2家族蛋白及磷酸化BCL-2(pBCL-2)蛋白表达量,并通过光密度法进行半定量分析.通过XTT法及免疫共沉淀法检测S1与特异性信号调节激酶MEK/ERK抑制剂PD98059联合作用下的AML细胞活性及其BCL-2家族蛋白之间的相互作用.结果:S1能够诱导AML原代细胞凋亡.根据AML原代细胞对S1的敏感度不同,将27例AML原代细胞分为3组:①敏感组12例,IC50＜ 15 μmol/L;②中度敏感组8例,14 μmol＜IC50＜ 30 μmol/L;③耐药组7例,IC50＞ 30 μmol/L.pBCL-2/(BCL-2+ MCL-1)的比值与IC50呈现良好的线性相关性(R2 =0.71,P＜0.0001).在PD98059的协同作用下,pBCL-2水平下调,S1诱导AML原代耐药组细胞的凋亡率由9.8％显著提升至64.5％(联合指数CI =0.4),并且促进了AML原代耐药细胞BCL-2家族蛋白之间形成异源二聚体的解离.结论:S1与PD98059的联合作用能够降低AML患者pBCL-2水平,干扰BCL-2与促凋亡蛋白的相互作用.
목적:탐토유BH3역(BH3 only domain,BH3)모의물3-류마람기-8-양-8H-액병[1,2-b]필각-9-정(S1)유도급성수계백혈병(AML)원대세포조망적분자표지물.방법:분리27례인초발AML적단개핵세포,사용류식세포술검측세포조망.통과사담서염(XTT)법검측S1작용하AML세포적반수억제농도(IC50).응용Westernblot측정AML세포중BCL-2가족단백급린산화BCL-2(pBCL-2)단백표체량,병통과광밀도법진행반정량분석.통과XTT법급면역공침정법검측S1여특이성신호조절격매MEK/ERK억제제PD98059연합작용하적AML세포활성급기BCL-2가족단백지간적상호작용.결과:S1능구유도AML원대세포조망.근거AML원대세포대S1적민감도불동,장27례AML원대세포분위3조:①민감조12례,IC50＜ 15 μmol/L;②중도민감조8례,14 μmol＜IC50＜ 30 μmol/L;③내약조7례,IC50＞ 30 μmol/L.pBCL-2/(BCL-2+ MCL-1)적비치여IC50정현량호적선성상관성(R2 =0.71,P＜0.0001).재PD98059적협동작용하,pBCL-2수평하조,S1유도AML원대내약조세포적조망솔유9.8％현저제승지64.5％(연합지수CI =0.4),병차촉진료AML원대내약세포BCL-2가족단백지간형성이원이취체적해리.결론:S1여PD98059적연합작용능구강저AML환자pBCL-2수평,간우BCL-2여촉조망단백적상호작용.