斑节对虾cyclin H基因的原核表达和蛋白纯化
반절대하cyclin H기인적원핵표체화단백순화
Prokaryotic expression and protein purification of cyclin H in giant tiger shrimp Penaeus monodon
  • 万方数据
    广东农业科学 엄동농업과학
    GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
    2015年 3期 125-130 ,共6页

    郭松%傅明骏%赵超%江世贵%杨其彬%彭超%李伟杰%邱丽华

    곽송%부명준%조초%강세귀%양기빈%팽초%리위걸%구려화

    斑节对虾%细胞周期蛋白H%原核表达 斑節對蝦%細胞週期蛋白H%原覈錶達
    반절대하%세포주기단백H%원핵표체
    cyclin H是细胞分裂周期调控中的重要因子,研究斑节对虾cyclin H对阐明斑节对虾卵巢发育机制有重要意义.构建了斑节对虾cyclinH的重组表达质粒pET21a/cyclinH,利用原核表达技术进行诱导表达获得目的蛋白,并用亲和层析技术进行纯化,用SDS-PAGE、Western blot和质谱联用分析诱导和纯化结果.结果表明,斑节对虾cyclin H重组蛋白获得了表达,纯化的蛋白经鉴定为cyclin H重组蛋白;在22℃和37℃培养条件下,重组蛋白在LA和YTGA两种培养基上均能被诱导表达;22℃条件下,部分融合蛋白为可溶性表达;在37℃培养条件下LA培养基获得较好的效果,且均以包涵体形式存在.
    cyclin H시세포분렬주기조공중적중요인자,연구반절대하cyclin H대천명반절대하란소발육궤제유중요의의.구건료반절대하cyclinH적중조표체질립pET21a/cyclinH,이용원핵표체기술진행유도표체획득목적단백,병용친화층석기술진행순화,용SDS-PAGE、Western blot화질보련용분석유도화순화결과.결과표명,반절대하cyclin H중조단백획득료표체,순화적단백경감정위cyclin H중조단백;재22℃화37℃배양조건하,중조단백재LA화YTGA량충배양기상균능피유도표체;22℃조건하,부분융합단백위가용성표체;재37℃배양조건하LA배양기획득교호적효과,차균이포함체형식존재.
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