中国癌症防治杂志
中國癌癥防治雜誌
중국암증방치잡지
CHINESE JOURNAL OF ONCOLOGY PREVENTION AND TREATMENT
2015年
1期
1-5
,共5页
韦江%彭海燕%苏翠云%宋向群%王惠临%宁瑞玲%周韶璋
韋江%彭海燕%囌翠雲%宋嚮群%王惠臨%寧瑞玲%週韶璋
위강%팽해연%소취운%송향군%왕혜림%저서령%주소장
肺肿瘤%EML4-ALK融合基因%H2228细胞%克唑替尼%获得性耐药%BIM
肺腫瘤%EML4-ALK融閤基因%H2228細胞%剋唑替尼%穫得性耐藥%BIM
폐종류%EML4-ALK융합기인%H2228세포%극서체니%획득성내약%BIM
目的 建立人肺腺癌H2228克唑替尼耐药细胞株,探讨克唑替尼(crizotinib)诱导EML4-ALK融合基因阳性表达的人肺腺癌细胞H2228在BIM信号通路中的作用.方法 克唑替尼按50 nmol/L、100 nmol/L、200 nmol/L、500 nmol/L、1 000 nmol/L的浓度逐步递增法诱导人肺腺癌H2228细胞株获得性耐药;分别采用MTT法和流式细胞术检测H2228和H2228/CR细胞在不同浓度克唑替尼作用后的IC50和细胞凋亡率;采用Western blot法检测H2228和H2228/CR细胞在BIM信号通路关键分子ALK、p-ALK、ERK、p-ERK及BIM蛋白表达的变化.结果 成功诱导克唑替尼耐药细胞株H2228/CR;MTT法检测H2228/CR细胞和H2228细胞的IC50分别为3 418 nmol/L、335 nmol/L,H2228/CR细胞的耐药指数为1020,H2228/CR细胞在不同浓度克唑替尼作用下的增殖抑制率低于H2228细胞(P＜0.05);流式细胞术检测显示克唑替尼对H2228细胞有促凋亡作用,且呈时间依赖性(P＜0.05),H2228/CR细胞的凋亡率明显低于H2228细胞的凋亡率(P＜0.05);Western blot法检测显示H2228/CR细胞的p-ALK、p-ERK的表达不受抑制,BIM蛋白表达无上调趋势.结论 实验表明H2228/CR耐药细胞中的BIM蛋白的表达与其耐药有关.初步阐明EML4-ALK阳性表达的非小细胞肺癌克唑替尼耐药产生的可能机制,BIM在诱导EML4-ALK阳性表达的人肺腺癌细胞株H2228对克唑替尼产生耐药发挥重要作用,提示BIM可作为克服克唑替尼耐药的一个靶点.
目的 建立人肺腺癌H2228剋唑替尼耐藥細胞株,探討剋唑替尼(crizotinib)誘導EML4-ALK融閤基因暘性錶達的人肺腺癌細胞H2228在BIM信號通路中的作用.方法 剋唑替尼按50 nmol/L、100 nmol/L、200 nmol/L、500 nmol/L、1 000 nmol/L的濃度逐步遞增法誘導人肺腺癌H2228細胞株穫得性耐藥;分彆採用MTT法和流式細胞術檢測H2228和H2228/CR細胞在不同濃度剋唑替尼作用後的IC50和細胞凋亡率;採用Western blot法檢測H2228和H2228/CR細胞在BIM信號通路關鍵分子ALK、p-ALK、ERK、p-ERK及BIM蛋白錶達的變化.結果 成功誘導剋唑替尼耐藥細胞株H2228/CR;MTT法檢測H2228/CR細胞和H2228細胞的IC50分彆為3 418 nmol/L、335 nmol/L,H2228/CR細胞的耐藥指數為1020,H2228/CR細胞在不同濃度剋唑替尼作用下的增殖抑製率低于H2228細胞(P＜0.05);流式細胞術檢測顯示剋唑替尼對H2228細胞有促凋亡作用,且呈時間依賴性(P＜0.05),H2228/CR細胞的凋亡率明顯低于H2228細胞的凋亡率(P＜0.05);Western blot法檢測顯示H2228/CR細胞的p-ALK、p-ERK的錶達不受抑製,BIM蛋白錶達無上調趨勢.結論 實驗錶明H2228/CR耐藥細胞中的BIM蛋白的錶達與其耐藥有關.初步闡明EML4-ALK暘性錶達的非小細胞肺癌剋唑替尼耐藥產生的可能機製,BIM在誘導EML4-ALK暘性錶達的人肺腺癌細胞株H2228對剋唑替尼產生耐藥髮揮重要作用,提示BIM可作為剋服剋唑替尼耐藥的一箇靶點.
목적 건립인폐선암H2228극서체니내약세포주,탐토극서체니(crizotinib)유도EML4-ALK융합기인양성표체적인폐선암세포H2228재BIM신호통로중적작용.방법 극서체니안50 nmol/L、100 nmol/L、200 nmol/L、500 nmol/L、1 000 nmol/L적농도축보체증법유도인폐선암H2228세포주획득성내약;분별채용MTT법화류식세포술검측H2228화H2228/CR세포재불동농도극서체니작용후적IC50화세포조망솔;채용Western blot법검측H2228화H2228/CR세포재BIM신호통로관건분자ALK、p-ALK、ERK、p-ERK급BIM단백표체적변화.결과 성공유도극서체니내약세포주H2228/CR;MTT법검측H2228/CR세포화H2228세포적IC50분별위3 418 nmol/L、335 nmol/L,H2228/CR세포적내약지수위1020,H2228/CR세포재불동농도극서체니작용하적증식억제솔저우H2228세포(P＜0.05);류식세포술검측현시극서체니대H2228세포유촉조망작용,차정시간의뢰성(P＜0.05),H2228/CR세포적조망솔명현저우H2228세포적조망솔(P＜0.05);Western blot법검측현시H2228/CR세포적p-ALK、p-ERK적표체불수억제,BIM단백표체무상조추세.결론 실험표명H2228/CR내약세포중적BIM단백적표체여기내약유관.초보천명EML4-ALK양성표체적비소세포폐암극서체니내약산생적가능궤제,BIM재유도EML4-ALK양성표체적인폐선암세포주H2228대극서체니산생내약발휘중요작용,제시BIM가작위극복극서체니내약적일개파점.
