实用预防医学
實用預防醫學
실용예방의학
PRACTICAL PREVENTIVE MEDICINE
2015年
4期
385-389
,共5页
仇艳%蒋毅%刘海灿%李马超%万康林%刘志广
仇豔%蔣毅%劉海燦%李馬超%萬康林%劉誌廣
구염%장의%류해찬%리마초%만강림%류지엄
结核分枝杆菌%MPT64%多态性%胶体金
結覈分枝桿菌%MPT64%多態性%膠體金
결핵분지간균%MPT64%다태성%효체금
Mycobacterium tuberculosis%MPT64%Polymorphism%Colloidal gold method
目的 探讨中国结核分枝杆菌MPT64抗原的多态性及对其T/B细胞抗原表位的影响;应用MPT64抗原检测试剂盒对MPT64基因突变菌株和野生菌株进行检测,以进一步分析MPT64抗原多态性对结核感染检测的影响. 方法 从中国疾病预防控制中心传染病预防控制所结核室保存的2 346株国内结核分枝杆菌复合群临床分离株中挑选180株,对其MPT64基因扩增后进行序列比对,比较其T/B细胞抗原表位与非表位的多态性,对突变的菌株与野生菌株进行BACTEC MGIT 960系统与液体培养管进行培养,报阳后,用胶体金标记抗MPT64单克隆抗体采用免疫层析色谱法进行MPT64蛋白检测. 结果 180株临床分离株中有15株(包括2株BCG菌株)表现有MPT64蛋白的多态性,占菌株数的8.33％,8株菌有63 bp的缺失,4株菌有单位点的非同义突变,1株是单位点插入.MPT64基因的突变造成13个T细胞抗原表位(56.52％)和4个B细胞抗原表位(占80％)的改变,T/B细胞抗原表位区的dN/dS值均高于对应的非表位区.8株有63 bp缺失的菌株胶体金检测阴性,对应的野生株检测阳性;5株单位点突变的菌株与对应的野生菌株胶体金检测均阳性. 结论 中国结核分枝杆菌MPT64蛋白存在多态性,这是产生抗原改变的原因之一,这会影响抗原相关功能的改变并引起免疫逃逸.63 bp缺失会造成MPT64抗原检测试剂盒的假阴性,而某些单位点突变对检测效率无影响.
目的 探討中國結覈分枝桿菌MPT64抗原的多態性及對其T/B細胞抗原錶位的影響;應用MPT64抗原檢測試劑盒對MPT64基因突變菌株和野生菌株進行檢測,以進一步分析MPT64抗原多態性對結覈感染檢測的影響. 方法 從中國疾病預防控製中心傳染病預防控製所結覈室保存的2 346株國內結覈分枝桿菌複閤群臨床分離株中挑選180株,對其MPT64基因擴增後進行序列比對,比較其T/B細胞抗原錶位與非錶位的多態性,對突變的菌株與野生菌株進行BACTEC MGIT 960繫統與液體培養管進行培養,報暘後,用膠體金標記抗MPT64單剋隆抗體採用免疫層析色譜法進行MPT64蛋白檢測. 結果 180株臨床分離株中有15株(包括2株BCG菌株)錶現有MPT64蛋白的多態性,佔菌株數的8.33％,8株菌有63 bp的缺失,4株菌有單位點的非同義突變,1株是單位點插入.MPT64基因的突變造成13箇T細胞抗原錶位(56.52％)和4箇B細胞抗原錶位(佔80％)的改變,T/B細胞抗原錶位區的dN/dS值均高于對應的非錶位區.8株有63 bp缺失的菌株膠體金檢測陰性,對應的野生株檢測暘性;5株單位點突變的菌株與對應的野生菌株膠體金檢測均暘性. 結論 中國結覈分枝桿菌MPT64蛋白存在多態性,這是產生抗原改變的原因之一,這會影響抗原相關功能的改變併引起免疫逃逸.63 bp缺失會造成MPT64抗原檢測試劑盒的假陰性,而某些單位點突變對檢測效率無影響.
목적 탐토중국결핵분지간균MPT64항원적다태성급대기T/B세포항원표위적영향;응용MPT64항원검측시제합대MPT64기인돌변균주화야생균주진행검측,이진일보분석MPT64항원다태성대결핵감염검측적영향. 방법 종중국질병예방공제중심전염병예방공제소결핵실보존적2 346주국내결핵분지간균복합군림상분리주중도선180주,대기MPT64기인확증후진행서렬비대,비교기T/B세포항원표위여비표위적다태성,대돌변적균주여야생균주진행BACTEC MGIT 960계통여액체배양관진행배양,보양후,용효체금표기항MPT64단극륭항체채용면역층석색보법진행MPT64단백검측. 결과 180주림상분리주중유15주(포괄2주BCG균주)표현유MPT64단백적다태성,점균주수적8.33％,8주균유63 bp적결실,4주균유단위점적비동의돌변,1주시단위점삽입.MPT64기인적돌변조성13개T세포항원표위(56.52％)화4개B세포항원표위(점80％)적개변,T/B세포항원표위구적dN/dS치균고우대응적비표위구.8주유63 bp결실적균주효체금검측음성,대응적야생주검측양성;5주단위점돌변적균주여대응적야생균주효체금검측균양성. 결론 중국결핵분지간균MPT64단백존재다태성,저시산생항원개변적원인지일,저회영향항원상관공능적개변병인기면역도일.63 bp결실회조성MPT64항원검측시제합적가음성,이모사단위점돌변대검측효솔무영향.
