上海交通大学学报（农业科学版）
上海交通大學學報（農業科學版）
상해교통대학학보（농업과학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)
2015年
2期
34-38
,共5页
高云航%张喜宏%王巍%葛铮%历娜%娄玉杰%马红霞
高雲航%張喜宏%王巍%葛錚%歷娜%婁玉傑%馬紅霞
고운항%장희굉%왕외%갈쟁%력나%루옥걸%마홍하
蜡样芽胞杆菌%纤维素酶%克隆%乳酸菌%表达
蠟樣芽胞桿菌%纖維素酶%剋隆%乳痠菌%錶達
사양아포간균%섬유소매%극륭%유산균%표체
Bacillus cereus%cellulose%clone%Lactobacillus%expression
全球每年可产生的纤维素数量庞大.为了探索纤维素资源,更为科学合理的利用纤维素类饲料提供理论依据,根据蜡样芽胞杆菌纤维素酶基因序列设计1对特异性引物,扩增纤维素酶(Cell)基因,获得片段大小约为1 269 bp的目的基因.该基因与Bacillus cereus B4264、Bacillus cereus G9842纤维素酶基因序列同源性分别达96％和95％.将Cell基因与乳酸乳球菌表达载体pNZ8149进行连接,电转化入乳酸菌NZ3900中,构建纤维素高效分解基因工程乳酸菌,经乳链菌肽(Nisin)诱导表达,SDS-PAGE分析得到分子量大小约为42 kDa的目的片段.刚果红平板验证该表达蛋白具有纤维分解活性.FPA法测定表达产物酶活力为0.57 U/mL.该基因的成功表达,对纤维素基因工程菌的相关研究具有指导意义.
全毬每年可產生的纖維素數量龐大.為瞭探索纖維素資源,更為科學閤理的利用纖維素類飼料提供理論依據,根據蠟樣芽胞桿菌纖維素酶基因序列設計1對特異性引物,擴增纖維素酶(Cell)基因,穫得片段大小約為1 269 bp的目的基因.該基因與Bacillus cereus B4264、Bacillus cereus G9842纖維素酶基因序列同源性分彆達96％和95％.將Cell基因與乳痠乳毬菌錶達載體pNZ8149進行連接,電轉化入乳痠菌NZ3900中,構建纖維素高效分解基因工程乳痠菌,經乳鏈菌肽(Nisin)誘導錶達,SDS-PAGE分析得到分子量大小約為42 kDa的目的片段.剛果紅平闆驗證該錶達蛋白具有纖維分解活性.FPA法測定錶達產物酶活力為0.57 U/mL.該基因的成功錶達,對纖維素基因工程菌的相關研究具有指導意義.
전구매년가산생적섬유소수량방대.위료탐색섬유소자원,경위과학합리적이용섬유소류사료제공이론의거,근거사양아포간균섬유소매기인서렬설계1대특이성인물,확증섬유소매(Cell)기인,획득편단대소약위1 269 bp적목적기인.해기인여Bacillus cereus B4264、Bacillus cereus G9842섬유소매기인서렬동원성분별체96％화95％.장Cell기인여유산유구균표체재체pNZ8149진행련접,전전화입유산균NZ3900중,구건섬유소고효분해기인공정유산균,경유련균태(Nisin)유도표체,SDS-PAGE분석득도분자량대소약위42 kDa적목적편단.강과홍평판험증해표체단백구유섬유분해활성.FPA법측정표체산물매활력위0.57 U/mL.해기인적성공표체,대섬유소기인공정균적상관연구구유지도의의.
