上海交通大学学报(农业科学版)
上海交通大學學報(農業科學版)
상해교통대학학보(농업과학판)
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)
2015年
2期
47-53
,共7页
高萍%宋小飞%戴靖波%王朝霞%徐汪节%乔中东
高萍%宋小飛%戴靖波%王朝霞%徐汪節%喬中東
고평%송소비%대정파%왕조하%서왕절%교중동
GX-50%皮肤老化%中博紫外线(UVB)%成纤维细胞
GX-50%皮膚老化%中博紫外線(UVB)%成纖維細胞
GX-50%피부노화%중박자외선(UVB)%성섬유세포
GX-50%skin aging%UVB%fibroblasts
为观察花椒中的提取物GX-50是否对UVB诱导的光老化皮肤细胞具保护作用,使用组织块法分离培养原代人皮肤成纤维细胞,通过观察不同剂量UVB照射后的细胞形态学改变确定后续实验的UVB单次照射剂量;MTT法检测不同浓度GX-50处理后的细胞活性;采用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)细胞化学染色法确定皮肤细胞衰老程度;测定丙二醛(MDA)和ROS含量评估皮肤细胞氧化损伤的程度;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞TGF-β1表达量的变化;Western blot法检测细胞胶原蛋白表达量的变化.结果显示UVB辐射成纤维细胞后,细胞胞体增大、颗粒增多、部分细胞死亡,在不引起细胞明显死亡的UVB最大剂量50 mJ/cm2作用下,10-6mol/L的GX-50在孵育24 h时可显著增加成纤维细胞存活率(125.7%,P<0.01);经UVB照射后细胞SA-β-Gal染色阳性率增加,GX-50预处理后辐射组的阳性率明显降低(45.9%,P<0.05);UVB组与对照组相比,MDA、ROS含量明显上升,GX-50预处理后辐射组MDA、ROS含量分别下降了22.6% (P<0.01),22.8%(P>0.05),基本与对照组持平;UVB辐射后TGF-β1分泌减少,GX-50预处理后辐射组则明显上升(14.7%,P<0.05);Western blot结果显示,UVB可显著抑制胶原蛋白的表达,而GX-50预处理后表达量则基本恢复.推断GX-50对UVB引起的皮肤成纤维细胞损伤起到了保护作用,其机制可能是清除自由基和抗氧化,同时活化被UVB抑制的TGF-β信号通路,从而增加了胶原蛋白的表达.
為觀察花椒中的提取物GX-50是否對UVB誘導的光老化皮膚細胞具保護作用,使用組織塊法分離培養原代人皮膚成纖維細胞,通過觀察不同劑量UVB照射後的細胞形態學改變確定後續實驗的UVB單次照射劑量;MTT法檢測不同濃度GX-50處理後的細胞活性;採用衰老相關β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)細胞化學染色法確定皮膚細胞衰老程度;測定丙二醛(MDA)和ROS含量評估皮膚細胞氧化損傷的程度;酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測細胞TGF-β1錶達量的變化;Western blot法檢測細胞膠原蛋白錶達量的變化.結果顯示UVB輻射成纖維細胞後,細胞胞體增大、顆粒增多、部分細胞死亡,在不引起細胞明顯死亡的UVB最大劑量50 mJ/cm2作用下,10-6mol/L的GX-50在孵育24 h時可顯著增加成纖維細胞存活率(125.7%,P<0.01);經UVB照射後細胞SA-β-Gal染色暘性率增加,GX-50預處理後輻射組的暘性率明顯降低(45.9%,P<0.05);UVB組與對照組相比,MDA、ROS含量明顯上升,GX-50預處理後輻射組MDA、ROS含量分彆下降瞭22.6% (P<0.01),22.8%(P>0.05),基本與對照組持平;UVB輻射後TGF-β1分泌減少,GX-50預處理後輻射組則明顯上升(14.7%,P<0.05);Western blot結果顯示,UVB可顯著抑製膠原蛋白的錶達,而GX-50預處理後錶達量則基本恢複.推斷GX-50對UVB引起的皮膚成纖維細胞損傷起到瞭保護作用,其機製可能是清除自由基和抗氧化,同時活化被UVB抑製的TGF-β信號通路,從而增加瞭膠原蛋白的錶達.
위관찰화초중적제취물GX-50시부대UVB유도적광노화피부세포구보호작용,사용조직괴법분리배양원대인피부성섬유세포,통과관찰불동제량UVB조사후적세포형태학개변학정후속실험적UVB단차조사제량;MTT법검측불동농도GX-50처리후적세포활성;채용쇠로상관β-반유당감매(SA-β-Gal)세포화학염색법학정피부세포쇠로정도;측정병이철(MDA)화ROS함량평고피부세포양화손상적정도;매련면역흡부시험(ELISA)검측세포TGF-β1표체량적변화;Western blot법검측세포효원단백표체량적변화.결과현시UVB복사성섬유세포후,세포포체증대、과립증다、부분세포사망,재불인기세포명현사망적UVB최대제량50 mJ/cm2작용하,10-6mol/L적GX-50재부육24 h시가현저증가성섬유세포존활솔(125.7%,P<0.01);경UVB조사후세포SA-β-Gal염색양성솔증가,GX-50예처리후복사조적양성솔명현강저(45.9%,P<0.05);UVB조여대조조상비,MDA、ROS함량명현상승,GX-50예처리후복사조MDA、ROS함량분별하강료22.6% (P<0.01),22.8%(P>0.05),기본여대조조지평;UVB복사후TGF-β1분비감소,GX-50예처리후복사조칙명현상승(14.7%,P<0.05);Western blot결과현시,UVB가현저억제효원단백적표체,이GX-50예처리후표체량칙기본회복.추단GX-50대UVB인기적피부성섬유세포손상기도료보호작용,기궤제가능시청제자유기화항양화,동시활화피UVB억제적TGF-β신호통로,종이증가료효원단백적표체.