CAJ | 학술논문

目的：探讨兔膝关节软骨细胞体外分离培养及鉴定方法，分析软骨细胞在体外不同阶段的生物学特性。方法取4周龄健康新西兰兔膝关节软骨，以机械分离和酶消化相结合的方法获取膝关节软骨细胞，经体外培养、传代。观察不同培养阶段细胞形态和生长，CCK－8法测定细胞增殖并绘制生长曲线，甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫荧光染色鉴定软骨细胞。结果兔软骨细胞经两步消化，可获取高纯度的软骨细胞，细胞活性率可达95％以上，甲苯胺蓝染色及免疫荧光呈阳性结果。原代细胞和第一代细胞呈多角形，传代4～5代后，细胞形态逐渐由多角形变为梭形，基质分泌氨基多糖和胶原染色变浅。结论成功建立了简单易行的软骨细胞分离、培养方法，通过传代可以获取大量实验细胞，但仅限于5代以内软骨细胞适用于组织工程研究。
목적：탐토토슬관절연골세포체외분리배양급감정방법，분석연골세포재체외불동계단적생물학특성。방법취4주령건강신서란토슬관절연골，이궤계분리화매소화상결합적방법획취슬관절연골세포，경체외배양、전대。관찰불동배양계단세포형태화생장，CCK－8법측정세포증식병회제생장곡선，갑분알람화Ⅱ형효원면역형광염색감정연골세포。결과토연골세포경량보소화，가획취고순도적연골세포，세포활성솔가체95％이상，갑분알람염색급면역형광정양성결과。원대세포화제일대세포정다각형，전대4～5대후，세포형태축점유다각형변위사형，기질분비안기다당화효원염색변천。결론성공건립료간단역행적연골세포분리、배양방법，통과전대가이획취대량실험세포，단부한우5대이내연골세포괄용우조직공정연구。