畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2015年
5期
26-30
,共5页
李海洋%殷秀辰%饶柏钟%刘惠莉
李海洋%慇秀辰%饒柏鐘%劉惠莉
리해양%은수신%요백종%류혜리
猪%乙型脑炎病毒%环介导等温扩增%诊断
豬%乙型腦炎病毒%環介導等溫擴增%診斷
저%을형뇌염병독%배개도등온확증%진단
swine%Japanese encephalitis virus%loop-mediated isothermal amplification%diagnosis
参考GenBank中猪乙型脑炎病毒(JEV)Ⅰ型和Ⅲ型毒株的E基因序列,通过比对分析,选取8个保守区域设计了6条引物,经条件优化及临床样品验证,本研究建立了能同时检测JEV Ⅰ型和Ⅲ型毒株E基因的RT-LAMP方法.该方法的最低检测灵敏限度为15 copies,具有较好的特异性,对猪常见病原如猪流感病毒(SIV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),猪细小病毒(PPV)和伪狂犬病病毒(PRV)等均没有特异性扩增.与RT-PCR检测方法相比,其灵敏性高10倍.用本研究建立的RT-LAMP方法检测来自屠宰场的1 500份猪血清,阳性检出率为0.4％,与RT-PCR吻合率达100％,表明本试验建立的RT-LAMP方法适用于Ⅰ、Ⅲ基因型JEV的快速、批量筛检,为JEV感染的流行病学调查提供了必要的技术手段.
參攷GenBank中豬乙型腦炎病毒(JEV)Ⅰ型和Ⅲ型毒株的E基因序列,通過比對分析,選取8箇保守區域設計瞭6條引物,經條件優化及臨床樣品驗證,本研究建立瞭能同時檢測JEV Ⅰ型和Ⅲ型毒株E基因的RT-LAMP方法.該方法的最低檢測靈敏限度為15 copies,具有較好的特異性,對豬常見病原如豬流感病毒(SIV)、豬瘟病毒(CSFV)、豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV),豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV),豬細小病毒(PPV)和偽狂犬病病毒(PRV)等均沒有特異性擴增.與RT-PCR檢測方法相比,其靈敏性高10倍.用本研究建立的RT-LAMP方法檢測來自屠宰場的1 500份豬血清,暘性檢齣率為0.4％,與RT-PCR吻閤率達100％,錶明本試驗建立的RT-LAMP方法適用于Ⅰ、Ⅲ基因型JEV的快速、批量篩檢,為JEV感染的流行病學調查提供瞭必要的技術手段.
삼고GenBank중저을형뇌염병독(JEV)Ⅰ형화Ⅲ형독주적E기인서렬,통과비대분석,선취8개보수구역설계료6조인물,경조건우화급림상양품험증,본연구건립료능동시검측JEV Ⅰ형화Ⅲ형독주E기인적RT-LAMP방법.해방법적최저검측령민한도위15 copies,구유교호적특이성,대저상견병원여저류감병독(SIV)、저온병독(CSFV)、저전염성위장염병독(TGEV),저번식여호흡종합정병독(PRRSV),저세소병독(PPV)화위광견병병독(PRV)등균몰유특이성확증.여RT-PCR검측방법상비,기령민성고10배.용본연구건립적RT-LAMP방법검측래자도재장적1 500빈저혈청,양성검출솔위0.4％,여RT-PCR문합솔체100％,표명본시험건립적RT-LAMP방법괄용우Ⅰ、Ⅲ기인형JEV적쾌속、비량사검,위JEV감염적류행병학조사제공료필요적기술수단.
