畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2015年
5期
12-15
,共4页
张玉婷%龚海燕%周勇志%巴音查汗%周金林
張玉婷%龔海燕%週勇誌%巴音查汗%週金林
장옥정%공해연%주용지%파음사한%주금림
镰形扇头蜱%P0基因%克隆%表达%鉴定
鐮形扇頭蜱%P0基因%剋隆%錶達%鑒定
렴형선두비%P0기인%극륭%표체%감정
Rhipicephalus haemaphysaloides%P0 gene%cloning%expression%identification
P0分子是一种核糖体蛋白,具有抗蜱免疫作用.本文采用RACE技术从镰形扇头蜱(Rhipicephalus haemaphysaloides)中获得了P0全长基因.通过对P0全长基因序列进行分析发现,P0全长基因为1 118 bp,具有一个编码319个氨基酸的开放阅读框,没有信号肽序列.推测P0的蛋白大小约为35 ku.P0与其他蜱种具有很高的同源性,与微小扇头蜱(Rhipicephalus microplus)和长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)的P0基因同源性分别为94％和87％.编码区克隆到表达载体pGEX-4T-1中,转化表达宿主菌BL21,可表达出分子量约为60 ku的重组融合蛋白.表达的蛋白以包涵体的形式存在于菌体中.表达产物经GST树脂纯化后可得到纯度较高的目的蛋白.抗P0重组蛋白鼠血清可以识别蜱体内的P0蛋白,大小在35 ku.研究结果将为镰形扇头蜱新型防治技术研究提供基础.
P0分子是一種覈糖體蛋白,具有抗蜱免疫作用.本文採用RACE技術從鐮形扇頭蜱(Rhipicephalus haemaphysaloides)中穫得瞭P0全長基因.通過對P0全長基因序列進行分析髮現,P0全長基因為1 118 bp,具有一箇編碼319箇氨基痠的開放閱讀框,沒有信號肽序列.推測P0的蛋白大小約為35 ku.P0與其他蜱種具有很高的同源性,與微小扇頭蜱(Rhipicephalus microplus)和長角血蜱(Haemaphysalis longicornis)的P0基因同源性分彆為94％和87％.編碼區剋隆到錶達載體pGEX-4T-1中,轉化錶達宿主菌BL21,可錶達齣分子量約為60 ku的重組融閤蛋白.錶達的蛋白以包涵體的形式存在于菌體中.錶達產物經GST樹脂純化後可得到純度較高的目的蛋白.抗P0重組蛋白鼠血清可以識彆蜱體內的P0蛋白,大小在35 ku.研究結果將為鐮形扇頭蜱新型防治技術研究提供基礎.
P0분자시일충핵당체단백,구유항비면역작용.본문채용RACE기술종렴형선두비(Rhipicephalus haemaphysaloides)중획득료P0전장기인.통과대P0전장기인서렬진행분석발현,P0전장기인위1 118 bp,구유일개편마319개안기산적개방열독광,몰유신호태서렬.추측P0적단백대소약위35 ku.P0여기타비충구유흔고적동원성,여미소선두비(Rhipicephalus microplus)화장각혈비(Haemaphysalis longicornis)적P0기인동원성분별위94％화87％.편마구극륭도표체재체pGEX-4T-1중,전화표체숙주균BL21,가표체출분자량약위60 ku적중조융합단백.표체적단백이포함체적형식존재우균체중.표체산물경GST수지순화후가득도순도교고적목적단백.항P0중조단백서혈청가이식별비체내적P0단백,대소재35 ku.연구결과장위렴형선두비신형방치기술연구제공기출.
