CAJ | 학술논문

目的:探讨下调磷酸核糖焦磷酸合成酶亚基Ⅱ(PRPS2)基因表达对人结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响.方法:构建PRPS2基因干扰载体sh-PRPS2,正常对照组不转染载体,阴性对照组转染阴性对照载体sh-PRPS2-0,3个实验组分别转染干扰载体sh-PRPS2-1、sh-PRPS2-2和sh-PRPS2-3,经DNA测序鉴定后转染人结肠癌HCT116细胞,分别采用RT-PCR和Western blot法检测各载体转染后细胞PRPS2 mRNA和蛋白水平的表达变化,CCK8试剂盒检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡的变化.结果:经DNA测序证实成功构建sh-PRPS2干扰载体3个,分别为sh-PRPS2-1、sh-PRPS2-2和sh-PRPS2-3.将上述3个干扰载体分别转染HCT116细胞72 h后,RT-PCR结果显示,PRPS2 mRNA相对表达量依次为0.61±0.03、0.89±0.02、0.27±0.05,与对照组比较,均显著下降(P＜0.05).Western blot结果显示,PRPS2蛋白相对表达量依次为0.37±0.06、0.84±0.05、0.30±0.04,与对照组比较均显著下降(P＜0.05).转染sh-PRPS2-3载体72 h后细胞增殖抑制率达19.8％±2.4％,凋亡率上升至68.4％±4.6％,G0/G1期细胞比例上升为12.9％±3.8％.结论:PRPS2的低表达可以有效抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,细胞阻滞于G0/G1期,本研究为肿瘤的靶向治疗提供了研究基础.
목적:탐토하조린산핵당초린산합성매아기Ⅱ(PRPS2)기인표체대인결장암HCT116세포증식화조망적영향.방법:구건PRPS2기인간우재체sh-PRPS2,정상대조조불전염재체,음성대조조전염음성대조재체sh-PRPS2-0,3개실험조분별전염간우재체sh-PRPS2-1、sh-PRPS2-2화sh-PRPS2-3,경DNA측서감정후전염인결장암HCT116세포,분별채용RT-PCR화Western blot법검측각재체전염후세포PRPS2 mRNA화단백수평적표체변화,CCK8시제합검측세포증식능력,류식세포술검측세포주기급조망적변화.결과:경DNA측서증실성공구건sh-PRPS2간우재체3개,분별위sh-PRPS2-1、sh-PRPS2-2화sh-PRPS2-3.장상술3개간우재체분별전염HCT116세포72 h후,RT-PCR결과현시,PRPS2 mRNA상대표체량의차위0.61±0.03、0.89±0.02、0.27±0.05,여대조조비교,균현저하강(P＜0.05).Western blot결과현시,PRPS2단백상대표체량의차위0.37±0.06、0.84±0.05、0.30±0.04,여대조조비교균현저하강(P＜0.05).전염sh-PRPS2-3재체72 h후세포증식억제솔체19.8％±2.4％,조망솔상승지68.4％±4.6％,G0/G1기세포비례상승위12.9％±3.8％.결론:PRPS2적저표체가이유효억제세포증식,촉진세포조망,세포조체우G0/G1기,본연구위종류적파향치료제공료연구기출.