医用生物力学
醫用生物力學
의용생물역학
JOURNAL OF MEDICAL BIOMECHANICS
2015年
2期
154-158,166
,共6页
欧阳宁鹃%张鹏%傅润卿%王洁%房兵%江凌勇
歐暘寧鵑%張鵬%傅潤卿%王潔%房兵%江凌勇
구양저견%장붕%부윤경%왕길%방병%강릉용
Forkhead转录因子1%持续张应力%骨向分化%成骨细胞
Forkhead轉錄因子1%持續張應力%骨嚮分化%成骨細胞
Forkhead전록인자1%지속장응력%골향분화%성골세포
Forkhead transcription factor (FoxO1)%Continuous tensile stress%Osteogenic differentiation%Osteoblast
目的 研究体外持续张应力对MC3T3-E1细胞成骨向分化过程中Forkhead转录因子1(Forkhead box proteinO1,FoxO1)表达的影响,探讨FoxO1在持续张应力促进骨向分化机制中的作用.方法 MC3T3-E1细胞接种,应用FX-4000TTM细胞应力加载系统予以体外力学干预.施加频率1 Hz、幅度10％的张应力,按照加力时间长短分为对照和l、4、6、12、24、48、72 h组.运用酶化学染色、实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹、细胞免疫荧光等方法观察持续张应力对MC3T3-E1成骨能力变化的影响及FoxO1基因、蛋白表达和细胞定位情况.结果 (1)持续张应力能够促进MC3T3-E1骨向分化.细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)表达量在24、48 h显著高于对照组,骨钙素(osteocalcin,OCN)表达水平于72 h达峰值并显著高于对照组,骨特异性转录因子(runt-related transcription factor-2,Runx2)表达量在4h与对照组相比显著升高,其蛋白表达量也随加力时间而改变.加力组ALP染色结果与对照组有显著差异.(2)持续张应力促进FoxO1的基因和蛋白表达.FoxO1基因表达水平24 h增高最明显,其蛋白表达量于12 h显著上升.(3)加力6 h FoxO1胞核聚集,胞浆可见,但于24h转位在胞浆大量表达.结论 10％持续张应力可以促进MC3T3-E1的成骨向分化,同时FoxO1基因和蛋白表达上调、蛋白定位改变.探寻FoxO1表达水平和定位情况在力学刺激下的变化规律,可为研究其在力学刺激中发挥的作用提供实验基础.
目的 研究體外持續張應力對MC3T3-E1細胞成骨嚮分化過程中Forkhead轉錄因子1(Forkhead box proteinO1,FoxO1)錶達的影響,探討FoxO1在持續張應力促進骨嚮分化機製中的作用.方法 MC3T3-E1細胞接種,應用FX-4000TTM細胞應力加載繫統予以體外力學榦預.施加頻率1 Hz、幅度10％的張應力,按照加力時間長短分為對照和l、4、6、12、24、48、72 h組.運用酶化學染色、實時熒光定量PCR、蛋白免疫印跡、細胞免疫熒光等方法觀察持續張應力對MC3T3-E1成骨能力變化的影響及FoxO1基因、蛋白錶達和細胞定位情況.結果 (1)持續張應力能夠促進MC3T3-E1骨嚮分化.細胞堿性燐痠酶(alkaline phosphatase,ALP)錶達量在24、48 h顯著高于對照組,骨鈣素(osteocalcin,OCN)錶達水平于72 h達峰值併顯著高于對照組,骨特異性轉錄因子(runt-related transcription factor-2,Runx2)錶達量在4h與對照組相比顯著升高,其蛋白錶達量也隨加力時間而改變.加力組ALP染色結果與對照組有顯著差異.(2)持續張應力促進FoxO1的基因和蛋白錶達.FoxO1基因錶達水平24 h增高最明顯,其蛋白錶達量于12 h顯著上升.(3)加力6 h FoxO1胞覈聚集,胞漿可見,但于24h轉位在胞漿大量錶達.結論 10％持續張應力可以促進MC3T3-E1的成骨嚮分化,同時FoxO1基因和蛋白錶達上調、蛋白定位改變.探尋FoxO1錶達水平和定位情況在力學刺激下的變化規律,可為研究其在力學刺激中髮揮的作用提供實驗基礎.
목적 연구체외지속장응력대MC3T3-E1세포성골향분화과정중Forkhead전록인자1(Forkhead box proteinO1,FoxO1)표체적영향,탐토FoxO1재지속장응력촉진골향분화궤제중적작용.방법 MC3T3-E1세포접충,응용FX-4000TTM세포응력가재계통여이체외역학간예.시가빈솔1 Hz、폭도10％적장응력,안조가력시간장단분위대조화l、4、6、12、24、48、72 h조.운용매화학염색、실시형광정량PCR、단백면역인적、세포면역형광등방법관찰지속장응력대MC3T3-E1성골능력변화적영향급FoxO1기인、단백표체화세포정위정황.결과 (1)지속장응력능구촉진MC3T3-E1골향분화.세포감성린산매(alkaline phosphatase,ALP)표체량재24、48 h현저고우대조조,골개소(osteocalcin,OCN)표체수평우72 h체봉치병현저고우대조조,골특이성전록인자(runt-related transcription factor-2,Runx2)표체량재4h여대조조상비현저승고,기단백표체량야수가력시간이개변.가력조ALP염색결과여대조조유현저차이.(2)지속장응력촉진FoxO1적기인화단백표체.FoxO1기인표체수평24 h증고최명현,기단백표체량우12 h현저상승.(3)가력6 h FoxO1포핵취집,포장가견,단우24h전위재포장대량표체.결론 10％지속장응력가이촉진MC3T3-E1적성골향분화,동시FoxO1기인화단백표체상조、단백정위개변.탐심FoxO1표체수평화정위정황재역학자격하적변화규률,가위연구기재역학자격중발휘적작용제공실험기출.
