安徽医药
安徽醫藥
안휘의약
ANHUI MEDICAL AND PHARMACEUTICAL JOURNAL
2015年
5期
855-857
,共3页
雷蕾%张智燕%周志斌%彭军%姜丹
雷蕾%張智燕%週誌斌%彭軍%薑丹
뢰뢰%장지연%주지빈%팽군%강단
溶血磷脂酸%THP-1 细胞%Toll样,受体4单克隆抗体核因子-κB
溶血燐脂痠%THP-1 細胞%Toll樣,受體4單剋隆抗體覈因子-κB
용혈린지산%THP-1 세포%Toll양,수체4단극륭항체핵인자-κB
lysophosphatidic acid%THP-1 cells%TLR4 monoclonal antibody,nuclear factor-κB
目的：通过拮抗Toll样受体4（TLR4）观察其对于溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid，LPA）诱导的人单核细胞株THP-1细胞的核因子-κB（nuclear factor-kappaB，NF-κB）p65表达的影响以及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平的变化。方法取THP-1细胞，LPA以不同浓度水平（0～10μmol·L－1）刺激4 h，或1μmol·L－1浓度刺激不同时间（0～8 h），酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞因子TNF-α，随后在LPA （1μmol·L－1）条件下分别予不同浓度TLR4单克隆抗体（TLR4 mAb）（5，20，30 mg·L－1）干预THP-1细胞，观察其对LPA诱导的核蛋白NF-κB p65表达及TNF-α分泌水平的影响。结果 LPA以剂量依赖方式促进TNF-α分泌，并可诱导THP-1细胞NF-κB p65活化，予TLR4 mAb阻断TLR4后，可显著抑制NF-κB p65表达及TNF-α分泌。结论 LPA可经由Toll4／NF-κB信号途径激活单核细胞，最终引起TNF-α等炎性因子的分泌，参与动脉粥样硬化进程。
目的：通過拮抗Toll樣受體4（TLR4）觀察其對于溶血燐脂痠（lysophosphatidic acid，LPA）誘導的人單覈細胞株THP-1細胞的覈因子-κB（nuclear factor-kappaB，NF-κB）p65錶達的影響以及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平的變化。方法取THP-1細胞，LPA以不同濃度水平（0～10μmol·L－1）刺激4 h，或1μmol·L－1濃度刺激不同時間（0～8 h），酶聯免疫吸附法（ELISA）測定細胞因子TNF-α，隨後在LPA （1μmol·L－1）條件下分彆予不同濃度TLR4單剋隆抗體（TLR4 mAb）（5，20，30 mg·L－1）榦預THP-1細胞，觀察其對LPA誘導的覈蛋白NF-κB p65錶達及TNF-α分泌水平的影響。結果 LPA以劑量依賴方式促進TNF-α分泌，併可誘導THP-1細胞NF-κB p65活化，予TLR4 mAb阻斷TLR4後，可顯著抑製NF-κB p65錶達及TNF-α分泌。結論 LPA可經由Toll4／NF-κB信號途徑激活單覈細胞，最終引起TNF-α等炎性因子的分泌，參與動脈粥樣硬化進程。
목적：통과길항Toll양수체4（TLR4）관찰기대우용혈린지산（lysophosphatidic acid，LPA）유도적인단핵세포주THP-1세포적핵인자-κB（nuclear factor-kappaB，NF-κB）p65표체적영향이급종류배사인자-α（TNF-α）수평적변화。방법취THP-1세포，LPA이불동농도수평（0～10μmol·L－1）자격4 h，혹1μmol·L－1농도자격불동시간（0～8 h），매련면역흡부법（ELISA）측정세포인자TNF-α，수후재LPA （1μmol·L－1）조건하분별여불동농도TLR4단극륭항체（TLR4 mAb）（5，20，30 mg·L－1）간예THP-1세포，관찰기대LPA유도적핵단백NF-κB p65표체급TNF-α분비수평적영향。결과 LPA이제량의뢰방식촉진TNF-α분비，병가유도THP-1세포NF-κB p65활화，여TLR4 mAb조단TLR4후，가현저억제NF-κB p65표체급TNF-α분비。결론 LPA가경유Toll4／NF-κB신호도경격활단핵세포，최종인기TNF-α등염성인자적분비，삼여동맥죽양경화진정。
Objective To observe the roles of Toll-like receptor 4 in the expression of nuclear factor-κB(NF-κB)p65 and the changes of cytokine TNF-αmediated by human monocytic THP-1 cell lines induced by lysophosphatidic acid (LPA)via antagonizing TLR4. Methods The human THP-1 cells were stimulated using different levels of LPA (0~10 μmol·L-1 )for 4h,or treated with LPA 1μmol·L-1 for different hours (0 ~8 h).The secretion of TNF-αwas detected using a sandwich ELISA,and then under LPA (1μmol·L-1 )condition,after the THP-1 cells were intervened using different levels of TLR4 mAb(5,20,30 mg·L-1 ),the effects on the expression levels of LPA-induced nucleoprotein NF-κB p65 and levels of secreted TNF-αwere observed.Results TNF-αsecre-tion in THP-1 cells was up-regulated by LPA in a dose-dependent way,and NF-κB p65 activation was also promoted.After TLR4 was blocked using TLR4 mAb,the expression of NF-κBp65 and secretion of TNF-αwere inhibited significantly.Conclusions The mono-cytic cell may be activated by LPA mediated by TLR4/N F-κB signaling pathway,ultimately up-regulates the secretion of proinflamma-tory cytokines such as TNF-α,thus involving in the pathological process in atherosclerosis.
