安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2015年
13期
63-64,104
,共3页
董万春%樊婷婷%阳立波%江海坤%张其安%方凌%倪娇娇%管灵霞%曹树青
董萬春%樊婷婷%暘立波%江海坤%張其安%方凌%倪嬌嬌%管靈霞%曹樹青
동만춘%번정정%양립파%강해곤%장기안%방릉%예교교%관령하%조수청
拟南芥%CDR6基因%过量表达载体%转基因植株
擬南芥%CDR6基因%過量錶達載體%轉基因植株
의남개%CDR6기인%과량표체재체%전기인식주
Arabidopsis thaliana%CDR6%Over-expression carrier%Transgenic plant
[目的]以拟南芥为材料克隆CDR6基因,构建CDR6基因的过量表达载体并筛选鉴定获得过表达植株.[方法]提取拟南芥mR-NA,反转录成cDNA,并以此为模板克隆CDR6基因CDS全长,通过限制性内切酶切割、T4 DNA连接酶连接,将CDR6基因CDS全长连接到带有35S强启动子的pXB094载体上;然后转化至Trans1-T1感受态细胞中,菌落PCR鉴定阳性单克隆并测序确认.将重组质粒转化至根瘤农杆菌GV3101菌株,通过浸花法侵染拟南芥野生型植株,通过抗性筛选和鉴定获得预期的转基因植株.[结果]菌落PCR鉴定和测序结果表明CDR6基因已成功构建至pXB094载体;通过抗性筛选并鉴定获得了过量表达阳性植株.[结论]筛选和鉴定获得的过量表达植株为研究CDR6基因的分子功能奠定了基础.
[目的]以擬南芥為材料剋隆CDR6基因,構建CDR6基因的過量錶達載體併篩選鑒定穫得過錶達植株.[方法]提取擬南芥mR-NA,反轉錄成cDNA,併以此為模闆剋隆CDR6基因CDS全長,通過限製性內切酶切割、T4 DNA連接酶連接,將CDR6基因CDS全長連接到帶有35S彊啟動子的pXB094載體上;然後轉化至Trans1-T1感受態細胞中,菌落PCR鑒定暘性單剋隆併測序確認.將重組質粒轉化至根瘤農桿菌GV3101菌株,通過浸花法侵染擬南芥野生型植株,通過抗性篩選和鑒定穫得預期的轉基因植株.[結果]菌落PCR鑒定和測序結果錶明CDR6基因已成功構建至pXB094載體;通過抗性篩選併鑒定穫得瞭過量錶達暘性植株.[結論]篩選和鑒定穫得的過量錶達植株為研究CDR6基因的分子功能奠定瞭基礎.
[목적]이의남개위재료극륭CDR6기인,구건CDR6기인적과량표체재체병사선감정획득과표체식주.[방법]제취의남개mR-NA,반전록성cDNA,병이차위모판극륭CDR6기인CDS전장,통과한제성내절매절할、T4 DNA련접매련접,장CDR6기인CDS전장련접도대유35S강계동자적pXB094재체상;연후전화지Trans1-T1감수태세포중,균락PCR감정양성단극륭병측서학인.장중조질립전화지근류농간균GV3101균주,통과침화법침염의남개야생형식주,통과항성사선화감정획득예기적전기인식주.[결과]균락PCR감정화측서결과표명CDR6기인이성공구건지pXB094재체;통과항성사선병감정획득료과량표체양성식주.[결론]사선화감정획득적과량표체식주위연구CDR6기인적분자공능전정료기출.
