中国生物防治学报
中國生物防治學報
중국생물방치학보
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICAL CONTROL
2015年
2期
208-215
,共8页
靳婷婷%李宁%王振营%何康来
靳婷婷%李寧%王振營%何康來
근정정%리저%왕진영%하강래
亚洲玉米螟%V-ATP酶A亚基%苏云金芽孢杆菌%Cry1Ac%结合蛋白
亞洲玉米螟%V-ATP酶A亞基%囌雲金芽孢桿菌%Cry1Ac%結閤蛋白
아주옥미명%V-ATP매A아기%소운금아포간균%Cry1Ac%결합단백
Ostrinia furnacalis%V-ATPase subunit A%Bacillus thuringiensis%Cry1Ac%binding protein
运用RT-PCR和RACE技术克隆了亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)幼虫中肠V-ATP酶A亚基基因ofvaa,其cDNA全序列长2535 bp,开放阅读框1854 bp,编码617个氨基酸,预测蛋白分子量68.01kD,等电点(pI)4.90.序列中包含有V-ATP酶A亚基特征,即ATP-synt_ ab_N结构域ATP-synt_ab_C结构域和可供ATP结合的保守区Walker A(GAFGCGKT),以及天门冬氨酸介导Mg2+反应的保守区WalkerB(SMMAD).原核表达并获得纯化的OfVAA多肽片段,配体杂交试验表明其能够与Cry1Ac毒素结合.生测结果表明,OfVAA多肽片段对亚洲玉米螟有一定的杀虫活性,当其与Cry1Ac毒素混合时杀虫效果呈现加性效应.鉴定的亚洲玉米螟V-ATP酶A亚基基因ofvaa cDNA序列在GenBank登录号为HQ434762.
運用RT-PCR和RACE技術剋隆瞭亞洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)幼蟲中腸V-ATP酶A亞基基因ofvaa,其cDNA全序列長2535 bp,開放閱讀框1854 bp,編碼617箇氨基痠,預測蛋白分子量68.01kD,等電點(pI)4.90.序列中包含有V-ATP酶A亞基特徵,即ATP-synt_ ab_N結構域ATP-synt_ab_C結構域和可供ATP結閤的保守區Walker A(GAFGCGKT),以及天門鼕氨痠介導Mg2+反應的保守區WalkerB(SMMAD).原覈錶達併穫得純化的OfVAA多肽片段,配體雜交試驗錶明其能夠與Cry1Ac毒素結閤.生測結果錶明,OfVAA多肽片段對亞洲玉米螟有一定的殺蟲活性,噹其與Cry1Ac毒素混閤時殺蟲效果呈現加性效應.鑒定的亞洲玉米螟V-ATP酶A亞基基因ofvaa cDNA序列在GenBank登錄號為HQ434762.
운용RT-PCR화RACE기술극륭료아주옥미명Ostrinia furnacalis(Guenée)유충중장V-ATP매A아기기인ofvaa,기cDNA전서렬장2535 bp,개방열독광1854 bp,편마617개안기산,예측단백분자량68.01kD,등전점(pI)4.90.서렬중포함유V-ATP매A아기특정,즉ATP-synt_ ab_N결구역ATP-synt_ab_C결구역화가공ATP결합적보수구Walker A(GAFGCGKT),이급천문동안산개도Mg2+반응적보수구WalkerB(SMMAD).원핵표체병획득순화적OfVAA다태편단,배체잡교시험표명기능구여Cry1Ac독소결합.생측결과표명,OfVAA다태편단대아주옥미명유일정적살충활성,당기여Cry1Ac독소혼합시살충효과정현가성효응.감정적아주옥미명V-ATP매A아기기인ofvaa cDNA서렬재GenBank등록호위HQ434762.
