现代畜牧兽医
現代畜牧獸醫
현대축목수의
LIAONING JOURNAL OF ANIMAL HUSBANDRY AND VETERINARY MEDICINE
2015年
3期
1-5
,共5页
赵健%胡桂学%董浩%张双%邵洪泽%王开%赵艳丽
趙健%鬍桂學%董浩%張雙%邵洪澤%王開%趙豔麗
조건%호계학%동호%장쌍%소홍택%왕개%조염려
鹅%卵黄IgY%提纯%酶标抗体
鵝%卵黃IgY%提純%酶標抗體
아%란황IgY%제순%매표항체
本试验采用辛酸去脂、饱和硫酸铵溶液盐析法提纯鹅卵黄抗体IgY,采用SDS-PAGE方法分析其纯度;用纯化后的IgY免疫试验兔,收集血清,测定血清抗体效价;采用辛酸-硫酸铵法结合Protein G树脂亲和层析法纯化免血清IgG,用改良的高碘酸钠法进行辣根过氧化物酶标记,直接ELISA法测定标记物效价.结果表明,提纯的鹅卵黄IgY浓度为11.5 mg/mL,纯度约为92％;血清琼脂扩散抗体效价为1∶32;Western Blotting试验证明,兔血清中含有抗鹅卵黄抗体IgY重链及轻链的特异性抗体;直接ELISA法测得标记物效价为1:1 100.
本試驗採用辛痠去脂、飽和硫痠銨溶液鹽析法提純鵝卵黃抗體IgY,採用SDS-PAGE方法分析其純度;用純化後的IgY免疫試驗兔,收集血清,測定血清抗體效價;採用辛痠-硫痠銨法結閤Protein G樹脂親和層析法純化免血清IgG,用改良的高碘痠鈉法進行辣根過氧化物酶標記,直接ELISA法測定標記物效價.結果錶明,提純的鵝卵黃IgY濃度為11.5 mg/mL,純度約為92％;血清瓊脂擴散抗體效價為1∶32;Western Blotting試驗證明,兔血清中含有抗鵝卵黃抗體IgY重鏈及輕鏈的特異性抗體;直接ELISA法測得標記物效價為1:1 100.
본시험채용신산거지、포화류산안용액염석법제순아란황항체IgY,채용SDS-PAGE방법분석기순도;용순화후적IgY면역시험토,수집혈청,측정혈청항체효개;채용신산-류산안법결합Protein G수지친화층석법순화면혈청IgG,용개량적고전산납법진행랄근과양화물매표기,직접ELISA법측정표기물효개.결과표명,제순적아란황IgY농도위11.5 mg/mL,순도약위92％;혈청경지확산항체효개위1∶32;Western Blotting시험증명,토혈청중함유항아란황항체IgY중련급경련적특이성항체;직접ELISA법측득표기물효개위1:1 100.
